中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2008年
6期
417-420
,共4页
邵丽军%李猛%张利芳%刘照惠
邵麗軍%李猛%張利芳%劉照惠
소려군%리맹%장리방%류조혜
大肠埃希菌%表达%乙型肝炎病毒%PreS2蛋白
大腸埃希菌%錶達%乙型肝炎病毒%PreS2蛋白
대장애희균%표체%을형간염병독%PreS2단백
目的 在大肠埃希菌( Escherichia coli )中表达乙肝病毒前S2(HBV PreS2)蛋白,并对其进行鉴定和纯化.方法 利用DNA重组技术,将全长的HBV PreS2基因克隆至pMAL-C2x[融合表达载体含麦芽糖结合蛋白(maltose-binding protein,MBP)标签蛋白]质粒中,构建pMAL-C2/S2表达载体,转化至 E.coli ,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的 蛋白的表达形式,依据其不同的表达形式采取适当的纯化方案,纯化产物经Western blot和ELISA法检测反应原性,经Xa因子切割去除MBP标签蛋白.结果 成功构建了表达载体pMAL-C2/S2,目的 蛋白为PreS2-MBP,以包涵体和可溶性2种形式表达.纯化产物能与anti-Hepatitis B virus PreS2 Antigen发生特异性反应.融合蛋白经Xa因子切割去除了MBP标签蛋白.结论 在 E. coli 中成功表达了HBV PreS2蛋白,为进一步研制新型HBV预防及免疫治疗制剂打下了基础.
目的 在大腸埃希菌( Escherichia coli )中錶達乙肝病毒前S2(HBV PreS2)蛋白,併對其進行鑒定和純化.方法 利用DNA重組技術,將全長的HBV PreS2基因剋隆至pMAL-C2x[融閤錶達載體含麥芽糖結閤蛋白(maltose-binding protein,MBP)標籤蛋白]質粒中,構建pMAL-C2/S2錶達載體,轉化至 E.coli ,經IPTG誘導錶達,SDS-PAGE分析目的 蛋白的錶達形式,依據其不同的錶達形式採取適噹的純化方案,純化產物經Western blot和ELISA法檢測反應原性,經Xa因子切割去除MBP標籤蛋白.結果 成功構建瞭錶達載體pMAL-C2/S2,目的 蛋白為PreS2-MBP,以包涵體和可溶性2種形式錶達.純化產物能與anti-Hepatitis B virus PreS2 Antigen髮生特異性反應.融閤蛋白經Xa因子切割去除瞭MBP標籤蛋白.結論 在 E. coli 中成功錶達瞭HBV PreS2蛋白,為進一步研製新型HBV預防及免疫治療製劑打下瞭基礎.
목적 재대장애희균( Escherichia coli )중표체을간병독전S2(HBV PreS2)단백,병대기진행감정화순화.방법 이용DNA중조기술,장전장적HBV PreS2기인극륭지pMAL-C2x[융합표체재체함맥아당결합단백(maltose-binding protein,MBP)표첨단백]질립중,구건pMAL-C2/S2표체재체,전화지 E.coli ,경IPTG유도표체,SDS-PAGE분석목적 단백적표체형식,의거기불동적표체형식채취괄당적순화방안,순화산물경Western blot화ELISA법검측반응원성,경Xa인자절할거제MBP표첨단백.결과 성공구건료표체재체pMAL-C2/S2,목적 단백위PreS2-MBP,이포함체화가용성2충형식표체.순화산물능여anti-Hepatitis B virus PreS2 Antigen발생특이성반응.융합단백경Xa인자절할거제료MBP표첨단백.결론 재 E. coli 중성공표체료HBV PreS2단백,위진일보연제신형HBV예방급면역치료제제타하료기출.
