世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2008年
16期
1716-1721
,共6页
田芳%宋敏%许培荣%刘红涛%薛乐勋
田芳%宋敏%許培榮%劉紅濤%薛樂勛
전방%송민%허배영%류홍도%설악훈
食管鳞癌%核因子-κB%RNA干扰%5-FU%Bcl-2
食管鱗癌%覈因子-κB%RNA榦擾%5-FU%Bcl-2
식관린암%핵인자-κB%RNA간우%5-FU%Bcl-2
目的: 利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响.方法:将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中,通过RTPCR检测0、24、48和72 h时段p65 mRNA的表达水平.Western blotting法检测p65和Bcl-2蛋白表达,Annexin V/PI复染结合流式细胞仪检测细胞凋亡,显微镜下观察p65 siRNA与5-FU单独或联合应用对食管鳞癌细胞形态学特性的影响.结果:EC9706和Eca109细胞转染p65 siRNA 24、48和72 h后,p65 mRNA的表达水平随时间的延长逐渐下调,在72 h的阻断效率最为明显,与0 h相比,差异有显著性(0.12±0.01 vs 0.28±0.05,0.1±0.01 vs 0.38±0.04,均P<0.05),转染72 h后,p65和Bcl-2蛋白表达水平下调.EC9706和Eca109转染p65siRNA后,细胞凋亡指数明显升高(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%,8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%,均P<0.05);p65 siRNA转染72 h后,EC9706和Eca109细胞增殖较慢;当p65 siRNA与5-FU联合作用,细胞增殖明显受到抑制.结论:p65 siRNA可阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,表明活化的NF-κB信号通路可成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点.
目的: 利用RNAi技術特異性的抑製NF-κB亞單位p65的錶達,觀察其對p65錶達的抑製作用及聯閤5-FU對食管鱗癌細胞Eca109和EC9706的影響.方法:將終濃度為50 nmol/L的p65 siRNA轉染到食管鱗癌細胞EC9706和Eca109中,通過RTPCR檢測0、24、48和72 h時段p65 mRNA的錶達水平.Western blotting法檢測p65和Bcl-2蛋白錶達,Annexin V/PI複染結閤流式細胞儀檢測細胞凋亡,顯微鏡下觀察p65 siRNA與5-FU單獨或聯閤應用對食管鱗癌細胞形態學特性的影響.結果:EC9706和Eca109細胞轉染p65 siRNA 24、48和72 h後,p65 mRNA的錶達水平隨時間的延長逐漸下調,在72 h的阻斷效率最為明顯,與0 h相比,差異有顯著性(0.12±0.01 vs 0.28±0.05,0.1±0.01 vs 0.38±0.04,均P<0.05),轉染72 h後,p65和Bcl-2蛋白錶達水平下調.EC9706和Eca109轉染p65siRNA後,細胞凋亡指數明顯升高(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%,8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%,均P<0.05);p65 siRNA轉染72 h後,EC9706和Eca109細胞增殖較慢;噹p65 siRNA與5-FU聯閤作用,細胞增殖明顯受到抑製.結論:p65 siRNA可阻斷NF-κB信號通路,下調NF-κB下遊基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的錶達,錶明活化的NF-κB信號通路可成為食管鱗癌基因治療中一箇重要的分子靶點.
목적: 이용RNAi기술특이성적억제NF-κB아단위p65적표체,관찰기대p65표체적억제작용급연합5-FU대식관린암세포Eca109화EC9706적영향.방법:장종농도위50 nmol/L적p65 siRNA전염도식관린암세포EC9706화Eca109중,통과RTPCR검측0、24、48화72 h시단p65 mRNA적표체수평.Western blotting법검측p65화Bcl-2단백표체,Annexin V/PI복염결합류식세포의검측세포조망,현미경하관찰p65 siRNA여5-FU단독혹연합응용대식관린암세포형태학특성적영향.결과:EC9706화Eca109세포전염p65 siRNA 24、48화72 h후,p65 mRNA적표체수평수시간적연장축점하조,재72 h적조단효솔최위명현,여0 h상비,차이유현저성(0.12±0.01 vs 0.28±0.05,0.1±0.01 vs 0.38±0.04,균P<0.05),전염72 h후,p65화Bcl-2단백표체수평하조.EC9706화Eca109전염p65siRNA후,세포조망지수명현승고(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%,8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%,균P<0.05);p65 siRNA전염72 h후,EC9706화Eca109세포증식교만;당p65 siRNA여5-FU연합작용,세포증식명현수도억제.결론:p65 siRNA가조단NF-κB신호통로,하조NF-κB하유기인중항조망단백Bcl-2적표체,표명활화적NF-κB신호통로가성위식관린암기인치료중일개중요적분자파점.
