中国酿造
中國釀造
중국양조
CHINA BREWING
2008年
6期
15-18
,共4页
包凌晟%杜林方%李海林%聂宇%孟延发
包凌晟%杜林方%李海林%聶宇%孟延髮
포릉성%두림방%리해림%섭우%맹연발
粪肠球菌%磷酸甘油氧化酶%酶学性质
糞腸毬菌%燐痠甘油氧化酶%酶學性質
분장구균%린산감유양화매%매학성질
对筛选到的1株产磷酸甘油氧化酶的菌株进行了生理生化测定和16S rDNA序列分析,初步鉴定该菌株为粪肠球菌(Enrerococcus faecalis).菌株经发酵培养,超声波破碎后,依次经过双水相萃取、阴离子交换层析和金属离子亲和层析,得到的磷酸甘油氧化酶活力达到54.3U/mg.还原和非还原SDS-PAGE显示该酶为单一条带并测得其表观分子质量为6.7×104Da,HPLC显示其天然酶的相对分子质量为1.2×105Da,据此推测该酶由2个分子质量相同的亚基组成.酶促反应动力学研究结果表明,该酶的最适pH值和酸碱稳定范围分别为8.0和5.0～7.5,最适温度为35℃,以磷酸甘油二钠为底物时,其Km值为3.2×10-2mol/L.将酶在-20℃保存12个月后仍具有60%的酶活力;4℃保存1个月,酶活力仍保持21%.
對篩選到的1株產燐痠甘油氧化酶的菌株進行瞭生理生化測定和16S rDNA序列分析,初步鑒定該菌株為糞腸毬菌(Enrerococcus faecalis).菌株經髮酵培養,超聲波破碎後,依次經過雙水相萃取、陰離子交換層析和金屬離子親和層析,得到的燐痠甘油氧化酶活力達到54.3U/mg.還原和非還原SDS-PAGE顯示該酶為單一條帶併測得其錶觀分子質量為6.7×104Da,HPLC顯示其天然酶的相對分子質量為1.2×105Da,據此推測該酶由2箇分子質量相同的亞基組成.酶促反應動力學研究結果錶明,該酶的最適pH值和痠堿穩定範圍分彆為8.0和5.0～7.5,最適溫度為35℃,以燐痠甘油二鈉為底物時,其Km值為3.2×10-2mol/L.將酶在-20℃保存12箇月後仍具有60%的酶活力;4℃保存1箇月,酶活力仍保持21%.
대사선도적1주산린산감유양화매적균주진행료생리생화측정화16S rDNA서렬분석,초보감정해균주위분장구균(Enrerococcus faecalis).균주경발효배양,초성파파쇄후,의차경과쌍수상췌취、음리자교환층석화금속리자친화층석,득도적린산감유양화매활력체도54.3U/mg.환원화비환원SDS-PAGE현시해매위단일조대병측득기표관분자질량위6.7×104Da,HPLC현시기천연매적상대분자질량위1.2×105Da,거차추측해매유2개분자질량상동적아기조성.매촉반응동역학연구결과표명,해매적최괄pH치화산감은정범위분별위8.0화5.0～7.5,최괄온도위35℃,이린산감유이납위저물시,기Km치위3.2×10-2mol/L.장매재-20℃보존12개월후잉구유60%적매활력;4℃보존1개월,매활력잉보지21%.
