现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2008年
5期
15-17
,共3页
人心肌肌钙蛋白I%表达%多克隆抗体
人心肌肌鈣蛋白I%錶達%多剋隆抗體
인심기기개단백I%표체%다극륭항체
目的 进行人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)基因原核表达裁体的构建,获得高纯度的心肌肌钙蛋白I并制备相应的多克隆抗体.方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段,将其插入原核表达载体形成重组体并导入宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达出带6个组氨酸标签的融合蛋白,Ni-NTA树脂纯化,纯化后的融合蛋白免疫小鼠,制备抗血清.通过ELISA,Western blot鉴定血清效价和特异性.结果 成功构建了cTnI的原核表达载体,并在大肠埃希菌中获得了高效表达.Western blot检测证实获得了抗cTnI抗体.结论 成功表达了cTnI蛋白并制备了其特异性抗体.
目的 進行人心肌肌鈣蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)基因原覈錶達裁體的構建,穫得高純度的心肌肌鈣蛋白I併製備相應的多剋隆抗體.方法 利用RT-PCR方法從人心肌細胞的總RNA中剋隆齣編碼人心肌肌鈣蛋白I的cDNA片段,將其插入原覈錶達載體形成重組體併導入宿主菌BL21(DE3)中,經IPTG誘導,錶達齣帶6箇組氨痠標籤的融閤蛋白,Ni-NTA樹脂純化,純化後的融閤蛋白免疫小鼠,製備抗血清.通過ELISA,Western blot鑒定血清效價和特異性.結果 成功構建瞭cTnI的原覈錶達載體,併在大腸埃希菌中穫得瞭高效錶達.Western blot檢測證實穫得瞭抗cTnI抗體.結論 成功錶達瞭cTnI蛋白併製備瞭其特異性抗體.
목적 진행인심기기개단백I(cardiac troponin I,cTnI)기인원핵표체재체적구건,획득고순도적심기기개단백I병제비상응적다극륭항체.방법 이용RT-PCR방법종인심기세포적총RNA중극륭출편마인심기기개단백I적cDNA편단,장기삽입원핵표체재체형성중조체병도입숙주균BL21(DE3)중,경IPTG유도,표체출대6개조안산표첨적융합단백,Ni-NTA수지순화,순화후적융합단백면역소서,제비항혈청.통과ELISA,Western blot감정혈청효개화특이성.결과 성공구건료cTnI적원핵표체재체,병재대장애희균중획득료고효표체.Western blot검측증실획득료항cTnI항체.결론 성공표체료cTnI단백병제비료기특이성항체.
