临床神经病学杂志
臨床神經病學雜誌
림상신경병학잡지
JOURNAL OF CLINICAL NEUROLOGY
2004年
5期
339-341
,共3页
徐运%王岚%管得宁%王翀%黄嵘%朱琳%陶元祥
徐運%王嵐%管得寧%王翀%黃嶸%硃琳%陶元祥
서운%왕람%관득저%왕충%황영%주림%도원상
血小板活化因子%神经元培养%神经毒性%N-甲基-D-天门冬氨酸
血小闆活化因子%神經元培養%神經毒性%N-甲基-D-天門鼕氨痠
혈소판활화인자%신경원배양%신경독성%N-갑기-D-천문동안산
目的探讨血小板活化因子(PAF)诱导的神经元凋亡是否涉及N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)信号传导通路.方法用原代小鼠大脑皮质神经元培养系统,不同剂量PAF处理神经元24 h或PAF受体拮抗剂(BN 52021)、NMDA受体拮抗剂(MK-801)和一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)预处理30 min;碘化物(PI)/calcein(钙黄绿素)染色,荧光显微镜摄像,计算细胞死亡率.同时免疫印迹蛋白测定神经型一氧化氮合成酶(nNOS)表达水平及用3H标记放免法检测nNOS的活性.结果 (1)不同剂量(0.01、0.1、0.3、0.6 μmol/L)的PAF处理神经元24 h,均可致神经元死亡,0.3和0.6 μmol/L组与对照组相比,差异均有显著性(均P<0.01).(2)PAF神经毒性作用不仅被BN 52021所拮抗,MK-801、L-NAME也可减轻其作用.(3)PAF增加神经元的nNOS蛋白的表达,同时也增加其活性.结论 PAF对神经元的损伤作用与NMDA信号通路激活有关.
目的探討血小闆活化因子(PAF)誘導的神經元凋亡是否涉及N-甲基-D-天門鼕氨痠(NMDA)信號傳導通路.方法用原代小鼠大腦皮質神經元培養繫統,不同劑量PAF處理神經元24 h或PAF受體拮抗劑(BN 52021)、NMDA受體拮抗劑(MK-801)和一氧化氮閤酶抑製劑(L-NAME)預處理30 min;碘化物(PI)/calcein(鈣黃綠素)染色,熒光顯微鏡攝像,計算細胞死亡率.同時免疫印跡蛋白測定神經型一氧化氮閤成酶(nNOS)錶達水平及用3H標記放免法檢測nNOS的活性.結果 (1)不同劑量(0.01、0.1、0.3、0.6 μmol/L)的PAF處理神經元24 h,均可緻神經元死亡,0.3和0.6 μmol/L組與對照組相比,差異均有顯著性(均P<0.01).(2)PAF神經毒性作用不僅被BN 52021所拮抗,MK-801、L-NAME也可減輕其作用.(3)PAF增加神經元的nNOS蛋白的錶達,同時也增加其活性.結論 PAF對神經元的損傷作用與NMDA信號通路激活有關.
목적탐토혈소판활화인자(PAF)유도적신경원조망시부섭급N-갑기-D-천문동안산(NMDA)신호전도통로.방법용원대소서대뇌피질신경원배양계통,불동제량PAF처리신경원24 h혹PAF수체길항제(BN 52021)、NMDA수체길항제(MK-801)화일양화담합매억제제(L-NAME)예처리30 min;전화물(PI)/calcein(개황록소)염색,형광현미경섭상,계산세포사망솔.동시면역인적단백측정신경형일양화담합성매(nNOS)표체수평급용3H표기방면법검측nNOS적활성.결과 (1)불동제량(0.01、0.1、0.3、0.6 μmol/L)적PAF처리신경원24 h,균가치신경원사망,0.3화0.6 μmol/L조여대조조상비,차이균유현저성(균P<0.01).(2)PAF신경독성작용불부피BN 52021소길항,MK-801、L-NAME야가감경기작용.(3)PAF증가신경원적nNOS단백적표체,동시야증가기활성.결론 PAF대신경원적손상작용여NMDA신호통로격활유관.
