寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2011年
1期
6-10
,共5页
徐前明%李国清%罗锋%程家林%程家林%岳彩玲%高振永
徐前明%李國清%囉鋒%程傢林%程傢林%嶽綵玲%高振永
서전명%리국청%라봉%정가림%정가림%악채령%고진영
人隐孢子虫%P23抗原基因%重组蛋白%免疫活性
人隱孢子蟲%P23抗原基因%重組蛋白%免疫活性
인은포자충%P23항원기인%중조단백%면역활성
为探索隐孢子虫病免疫预防的新途径,本文对猴源人隐孢子虫Cryptosporidium hominis P23抗原基因进行了克隆、表达及其免疫活性的测定.采用RT-PCR方法对猴源C.hominis P23抗原基因进行克隆,构建重组质粒pGEX 4T 1 P23,并用IPTG诱导其在E.Coli Rossetta中表达;采用SDS PAGE检测其表达效果;采用Dot ELISA和淋巴细胞转化试验分别检测其与抗体反应特性和淋巴细胞增殖情况.结果表明:所克隆的P23抗原基因大小为342 bp;重组质粒表达蛋白的大小为40 kDa(含26 kDa的融合蛋白GST),以1、5、10 μg剂量的重组蛋白rP23均能刺激鼠脾脏淋巴细胞增殖,并能够与感染猴血清中的抗体明显地发生反应.
為探索隱孢子蟲病免疫預防的新途徑,本文對猴源人隱孢子蟲Cryptosporidium hominis P23抗原基因進行瞭剋隆、錶達及其免疫活性的測定.採用RT-PCR方法對猴源C.hominis P23抗原基因進行剋隆,構建重組質粒pGEX 4T 1 P23,併用IPTG誘導其在E.Coli Rossetta中錶達;採用SDS PAGE檢測其錶達效果;採用Dot ELISA和淋巴細胞轉化試驗分彆檢測其與抗體反應特性和淋巴細胞增殖情況.結果錶明:所剋隆的P23抗原基因大小為342 bp;重組質粒錶達蛋白的大小為40 kDa(含26 kDa的融閤蛋白GST),以1、5、10 μg劑量的重組蛋白rP23均能刺激鼠脾髒淋巴細胞增殖,併能夠與感染猴血清中的抗體明顯地髮生反應.
위탐색은포자충병면역예방적신도경,본문대후원인은포자충Cryptosporidium hominis P23항원기인진행료극륭、표체급기면역활성적측정.채용RT-PCR방법대후원C.hominis P23항원기인진행극륭,구건중조질립pGEX 4T 1 P23,병용IPTG유도기재E.Coli Rossetta중표체;채용SDS PAGE검측기표체효과;채용Dot ELISA화림파세포전화시험분별검측기여항체반응특성화림파세포증식정황.결과표명:소극륭적P23항원기인대소위342 bp;중조질립표체단백적대소위40 kDa(함26 kDa적융합단백GST),이1、5、10 μg제량적중조단백rP23균능자격서비장림파세포증식,병능구여감염후혈청중적항체명현지발생반응.
