浙江师范大学学报（自然科学版）
浙江師範大學學報（自然科學版）
절강사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2011年
2期
191-196
,共6页
李涛%胡晓青%姜科声%周春燕
李濤%鬍曉青%薑科聲%週春燕
리도%호효청%강과성%주춘연
GATA4%重组腺病毒%心肌细胞%心肌肥大
GATA4%重組腺病毒%心肌細胞%心肌肥大
GATA4%중조선병독%심기세포%심기비대
利用AdEasy腺病毒表达系统构建了GATA4基因过表达腺病毒.编码大鼠GATA4基因的目的片段克隆入pAdTrackcmv质粒,pAdTtrackcmv-GATA4穿梭质粒经Pme I线性化后转入含pAdEasy-1的BJ5183菌进行同源重组.pAdEsay-GATA4重组质粒经卡那霉素抗性筛选及Pac I酶切鉴定.pAdEsay-GATA4转入293A细胞进行包装,产生具有感染性的重组病毒.Ad-GAT4重组病毒感染HeLa及乳鼠心肌细胞,通过免疫印迹及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测GATA4表达及促心肌肥大效应.Ad-GATA4重组病毒感染乳鼠心肌细胞后,诱导心肌细胞表面积明显增加,ANF表达明显增强.结果表明,Ad-GATA4腺病毒成功感染心肌细胞并诱导了大鼠心肌肥大表型的出现.
利用AdEasy腺病毒錶達繫統構建瞭GATA4基因過錶達腺病毒.編碼大鼠GATA4基因的目的片段剋隆入pAdTrackcmv質粒,pAdTtrackcmv-GATA4穿梭質粒經Pme I線性化後轉入含pAdEasy-1的BJ5183菌進行同源重組.pAdEsay-GATA4重組質粒經卡那黴素抗性篩選及Pac I酶切鑒定.pAdEsay-GATA4轉入293A細胞進行包裝,產生具有感染性的重組病毒.Ad-GAT4重組病毒感染HeLa及乳鼠心肌細胞,通過免疫印跡及實時定量聚閤酶鏈反應(Real-time PCR)檢測GATA4錶達及促心肌肥大效應.Ad-GATA4重組病毒感染乳鼠心肌細胞後,誘導心肌細胞錶麵積明顯增加,ANF錶達明顯增彊.結果錶明,Ad-GATA4腺病毒成功感染心肌細胞併誘導瞭大鼠心肌肥大錶型的齣現.
이용AdEasy선병독표체계통구건료GATA4기인과표체선병독.편마대서GATA4기인적목적편단극륭입pAdTrackcmv질립,pAdTtrackcmv-GATA4천사질립경Pme I선성화후전입함pAdEasy-1적BJ5183균진행동원중조.pAdEsay-GATA4중조질립경잡나매소항성사선급Pac I매절감정.pAdEsay-GATA4전입293A세포진행포장,산생구유감염성적중조병독.Ad-GAT4중조병독감염HeLa급유서심기세포,통과면역인적급실시정량취합매련반응(Real-time PCR)검측GATA4표체급촉심기비대효응.Ad-GATA4중조병독감염유서심기세포후,유도심기세포표면적명현증가,ANF표체명현증강.결과표명,Ad-GATA4선병독성공감염심기세포병유도료대서심기비대표형적출현.
