中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
10期
1742-1747
,共6页
滕勇%徐建丽%李旭升%胡蕴玉%王臻
滕勇%徐建麗%李旭升%鬍蘊玉%王臻
등용%서건려%리욱승%호온옥%왕진
单克隆培养%骨髓基质干细胞%多能成体干细胞%鉴定%分化
單剋隆培養%骨髓基質榦細胞%多能成體榦細胞%鑒定%分化
단극륭배양%골수기질간세포%다능성체간세포%감정%분화
背景:骨髓基质干细胞缺乏特异的表面识别分子,其鉴定一直是研究中的难题.目的:探索人骨髓基质干细胞培养条件,获得体外克隆化培养的成人骨髓基质干细胞,并对其进行表型分析及分化潜能鉴定.方法:外科手术取髂骨术中抽取骨髓,采用密度梯度离心法初步分离骨髓基质干细胞,用极限稀释法进行克隆化培养;流式细胞仪对克隆化培养的骨髓基质干细胞进行细胞表面标志检测,并进行体外成软骨、成骨及心肌细胞诱导,免疫组织化学及RT-PCR 检测成软骨、成骨及心肌细胞表达,确定其表型及分化潜能.结果与结论:单个细胞来源骨髓基质干细胞在体外1∶3 传代一般可以传28 代左右,24 代以前生长状态良好;经流式细胞仪检测,骨髓基质干细胞表达CD29,CD44,CD106,不表达CD14,CD34,CD45,HLA-DR ;骨髓基质干细胞体外可向成骨、成软骨及心肌细胞分化,提示体外克隆化培养的骨髓基质干细胞能维持良好的成体干细胞生物学特性.
揹景:骨髓基質榦細胞缺乏特異的錶麵識彆分子,其鑒定一直是研究中的難題.目的:探索人骨髓基質榦細胞培養條件,穫得體外剋隆化培養的成人骨髓基質榦細胞,併對其進行錶型分析及分化潛能鑒定.方法:外科手術取髂骨術中抽取骨髓,採用密度梯度離心法初步分離骨髓基質榦細胞,用極限稀釋法進行剋隆化培養;流式細胞儀對剋隆化培養的骨髓基質榦細胞進行細胞錶麵標誌檢測,併進行體外成軟骨、成骨及心肌細胞誘導,免疫組織化學及RT-PCR 檢測成軟骨、成骨及心肌細胞錶達,確定其錶型及分化潛能.結果與結論:單箇細胞來源骨髓基質榦細胞在體外1∶3 傳代一般可以傳28 代左右,24 代以前生長狀態良好;經流式細胞儀檢測,骨髓基質榦細胞錶達CD29,CD44,CD106,不錶達CD14,CD34,CD45,HLA-DR ;骨髓基質榦細胞體外可嚮成骨、成軟骨及心肌細胞分化,提示體外剋隆化培養的骨髓基質榦細胞能維持良好的成體榦細胞生物學特性.
배경:골수기질간세포결핍특이적표면식별분자,기감정일직시연구중적난제.목적:탐색인골수기질간세포배양조건,획득체외극륭화배양적성인골수기질간세포,병대기진행표형분석급분화잠능감정.방법:외과수술취가골술중추취골수,채용밀도제도리심법초보분리골수기질간세포,용겁한희석법진행극륭화배양;류식세포의대극륭화배양적골수기질간세포진행세포표면표지검측,병진행체외성연골、성골급심기세포유도,면역조직화학급RT-PCR 검측성연골、성골급심기세포표체,학정기표형급분화잠능.결과여결론:단개세포래원골수기질간세포재체외1∶3 전대일반가이전28 대좌우,24 대이전생장상태량호;경류식세포의검측,골수기질간세포표체CD29,CD44,CD106,불표체CD14,CD34,CD45,HLA-DR ;골수기질간세포체외가향성골、성연골급심기세포분화,제시체외극륭화배양적골수기질간세포능유지량호적성체간세포생물학특성.
