CAJ | 학술논문

目的获得表达人毒蕈碱样乙酰胆碱Ⅰ型受体(hm1R)的工程细胞株(CHO-hm1R)并鉴定表达受体是否具有相应的功能活性.方法以健康人基因组DNA为模板,PCR扩增hm1R之cDNA,并构建pcDNA3.1(+)-hm1R表达载体,转染CHO-K1细胞获得CHO-hm1R工程细胞株,将不同浓度的乙酰胆碱作用于细胞,以Fura-2为荧光探针检测细胞内钙离子浓度变化;同时,观察阿托品预处理对乙酰胆碱作用的影响.结果成功得到CHO-hm1R工程细胞株;乙酰胆碱10,100 μmol·L-1均可增高细胞内钙离子浓度,此反应可被阿托品500 μmol·L-1完全阻断.结论 CHO-hm1R工程细胞株可以用于hm1R配基的检测,为建立相关孤儿G蛋白偶联受体的研究体系提供借鉴.
목적획득표체인독심감양을선담감Ⅰ형수체(hm1R)적공정세포주(CHO-hm1R)병감정표체수체시부구유상응적공능활성.방법이건강인기인조DNA위모판,PCR확증hm1R지cDNA,병구건pcDNA3.1(+)-hm1R표체재체,전염CHO-K1세포획득CHO-hm1R공정세포주,장불동농도적을선담감작용우세포,이Fura-2위형광탐침검측세포내개리자농도변화;동시,관찰아탁품예처리대을선담감작용적영향.결과성공득도CHO-hm1R공정세포주;을선담감10,100 μmol·L-1균가증고세포내개리자농도,차반응가피아탁품500 μmol·L-1완전조단.결론 CHO-hm1R공정세포주가이용우hm1R배기적검측,위건립상관고인G단백우련수체적연구체계제공차감.