中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2009年
5期
970-975
,共6页
滑世轩%岑东%赵行%吕建新%涂植光%裴仁治
滑世軒%岑東%趙行%呂建新%塗植光%裴仁治
활세헌%잠동%조행%려건신%도식광%배인치
基因,NK4%克隆%基因表达%Raji细胞
基因,NK4%剋隆%基因錶達%Raji細胞
기인,NK4%극륭%기인표체%Raji세포
目的:克隆NK4基因,构建其重组真核表达载体,并观察其在Raji细胞中的表达.方法:从人肝组织中提取总RNA,行RT-PCR获得NK4基因cDNA,与载体pVITRO2-mcs构建重组真核表达载体,转染Raji细胞.潮霉素B筛选后,采用实时荧光定量PCR、ELISA、细胞免疫组化和半固体培养等方法检测NK4基因在Raji细胞的表达,筛选稳定表达的细胞株.结果:NK4基因获成功克隆并构建了重组真核表达载体pVITRO2-mcs-NK4;转染NK4基因后的Raji细胞经RT-PCR发现存在特异性DNA片段.NK4基因在Raji细胞可稳定表达NK4 mRNA和蛋白,且可抑制Raji细胞的增殖、迁徙和侵袭.结论:NK4基因成功克隆并构建了重组真核表达载体,转染Raji细胞后表达稳定.
目的:剋隆NK4基因,構建其重組真覈錶達載體,併觀察其在Raji細胞中的錶達.方法:從人肝組織中提取總RNA,行RT-PCR穫得NK4基因cDNA,與載體pVITRO2-mcs構建重組真覈錶達載體,轉染Raji細胞.潮黴素B篩選後,採用實時熒光定量PCR、ELISA、細胞免疫組化和半固體培養等方法檢測NK4基因在Raji細胞的錶達,篩選穩定錶達的細胞株.結果:NK4基因穫成功剋隆併構建瞭重組真覈錶達載體pVITRO2-mcs-NK4;轉染NK4基因後的Raji細胞經RT-PCR髮現存在特異性DNA片段.NK4基因在Raji細胞可穩定錶達NK4 mRNA和蛋白,且可抑製Raji細胞的增殖、遷徙和侵襲.結論:NK4基因成功剋隆併構建瞭重組真覈錶達載體,轉染Raji細胞後錶達穩定.
목적:극륭NK4기인,구건기중조진핵표체재체,병관찰기재Raji세포중적표체.방법:종인간조직중제취총RNA,행RT-PCR획득NK4기인cDNA,여재체pVITRO2-mcs구건중조진핵표체재체,전염Raji세포.조매소B사선후,채용실시형광정량PCR、ELISA、세포면역조화화반고체배양등방법검측NK4기인재Raji세포적표체,사선은정표체적세포주.결과:NK4기인획성공극륭병구건료중조진핵표체재체pVITRO2-mcs-NK4;전염NK4기인후적Raji세포경RT-PCR발현존재특이성DNA편단.NK4기인재Raji세포가은정표체NK4 mRNA화단백,차가억제Raji세포적증식、천사화침습.결론:NK4기인성공극륭병구건료중조진핵표체재체,전염Raji세포후표체은정.
