世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2009年
30期
3086-3091
,共6页
张学彦%刘志强%景德怀%关景明%刘伟%刘铁夫%刘冰熔
張學彥%劉誌彊%景德懷%關景明%劉偉%劉鐵伕%劉冰鎔
장학언%류지강%경덕부%관경명%류위%류철부%류빙용
p15INK4B%P21WAF1%基因转染%食管鳞癌
p15INK4B%P21WAF1%基因轉染%食管鱗癌
p15INK4B%P21WAF1%기인전염%식관린암
目的:探讨p15INK4B和p21WAF1基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响.方法:脂质体介导PcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染EC109细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞p15与p21基因mRNA表达,Western blot检测转染细胞P15和P21蛋白的表达.用MTT法和透射电镜检测p15和p21基因分别及联合转染对EC109细胞增殖与凋亡的影响,流式细胞仪检测EC109细胞周期分布与凋亡率.结果:p15和p21转染组EC109细胞生长速度低于空载体组与未转染组,联合转染组与二者单独转染组相比.亦明显抑制EC109细胞体外生长速度.p15和p21转染组EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组,S期则显著降低(G1期:60.52%±3.75%,63.12%±2.89% vs 42.17%±5.30%.41.38%±6.54%;S期:22.67%±1.25%,17.96%±2.03% vs 30.96%±3.33%,36.05%±1.78%,均P<0.01),并出现凋亡峰,透射电镜亦发现p15和p21转染组发生细胞凋亡,联合转染组发生更为明显的G1/S阻滞,G1期比例显著升高、S期比例明显降低(G1期:72.83%±2.31% vs60.52%±3.75%,63.12%±2.89%:S期:13.59%±2.59% vs 22.67%±1.25%,17.96%±2.03%.均P<0.05),凋亡率明显升高(21.21%±1.78%vs 4.32±1.74%,10.83%±2.40%,均P<0.01).结论:p15和p21基因联合转染在体外可以进一步增强对人食管鳞癌EC109细胞的抑制与诱导凋亡作用.
目的:探討p15INK4B和p21WAF1基因聯閤轉染對人食管鱗癌細胞繫EC109細胞增殖和凋亡的影響.方法:脂質體介導PcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21轉染EC109細胞,穩定篩選後用RT-PCR檢測轉染細胞p15與p21基因mRNA錶達,Western blot檢測轉染細胞P15和P21蛋白的錶達.用MTT法和透射電鏡檢測p15和p21基因分彆及聯閤轉染對EC109細胞增殖與凋亡的影響,流式細胞儀檢測EC109細胞週期分佈與凋亡率.結果:p15和p21轉染組EC109細胞生長速度低于空載體組與未轉染組,聯閤轉染組與二者單獨轉染組相比.亦明顯抑製EC109細胞體外生長速度.p15和p21轉染組EC109細胞髮生G1/S阻滯,G1期細胞比例顯著高于空載體組和未轉染組,S期則顯著降低(G1期:60.52%±3.75%,63.12%±2.89% vs 42.17%±5.30%.41.38%±6.54%;S期:22.67%±1.25%,17.96%±2.03% vs 30.96%±3.33%,36.05%±1.78%,均P<0.01),併齣現凋亡峰,透射電鏡亦髮現p15和p21轉染組髮生細胞凋亡,聯閤轉染組髮生更為明顯的G1/S阻滯,G1期比例顯著升高、S期比例明顯降低(G1期:72.83%±2.31% vs60.52%±3.75%,63.12%±2.89%:S期:13.59%±2.59% vs 22.67%±1.25%,17.96%±2.03%.均P<0.05),凋亡率明顯升高(21.21%±1.78%vs 4.32±1.74%,10.83%±2.40%,均P<0.01).結論:p15和p21基因聯閤轉染在體外可以進一步增彊對人食管鱗癌EC109細胞的抑製與誘導凋亡作用.
목적:탐토p15INK4B화p21WAF1기인연합전염대인식관린암세포계EC109세포증식화조망적영향.방법:지질체개도PcDNA3.1(+)-p15화pcDNA3.1(+)-p21전염EC109세포,은정사선후용RT-PCR검측전염세포p15여p21기인mRNA표체,Western blot검측전염세포P15화P21단백적표체.용MTT법화투사전경검측p15화p21기인분별급연합전염대EC109세포증식여조망적영향,류식세포의검측EC109세포주기분포여조망솔.결과:p15화p21전염조EC109세포생장속도저우공재체조여미전염조,연합전염조여이자단독전염조상비.역명현억제EC109세포체외생장속도.p15화p21전염조EC109세포발생G1/S조체,G1기세포비례현저고우공재체조화미전염조,S기칙현저강저(G1기:60.52%±3.75%,63.12%±2.89% vs 42.17%±5.30%.41.38%±6.54%;S기:22.67%±1.25%,17.96%±2.03% vs 30.96%±3.33%,36.05%±1.78%,균P<0.01),병출현조망봉,투사전경역발현p15화p21전염조발생세포조망,연합전염조발생경위명현적G1/S조체,G1기비례현저승고、S기비례명현강저(G1기:72.83%±2.31% vs60.52%±3.75%,63.12%±2.89%:S기:13.59%±2.59% vs 22.67%±1.25%,17.96%±2.03%.균P<0.05),조망솔명현승고(21.21%±1.78%vs 4.32±1.74%,10.83%±2.40%,균P<0.01).결론:p15화p21기인연합전염재체외가이진일보증강대인식관린암EC109세포적억제여유도조망작용.