大连工业大学学报
大連工業大學學報
대련공업대학학보
JOURNAL OF DALIAN POLYTECHNIC UNIVERSITY
2012年
1期
8-11
,共4页
马明飞%李树金%金凤燮%鱼红闪
馬明飛%李樹金%金鳳燮%魚紅閃
마명비%리수금%금봉섭%어홍섬
人参皂苷葡萄糖苷酶%大肠杆菌%表达
人參皂苷葡萄糖苷酶%大腸桿菌%錶達
인삼조감포도당감매%대장간균%표체
将人参皂苷葡萄糖苷酶的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒,并转化至大肠杆菌BL21( DE3)中.对该基因进行诱导表达,并对包涵体进行变性和复性.结果显示,经终浓度为0.5 mmol/L IPTG在30℃下诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析,目的蛋白主要以包涵体形式存在并确定其分子质量约为75 ku,与理论值基本相符,表明该基因得到了表达.包涵体经过变性和稀释复性后,经TLC活性检测,能够水解底物Rb1,表明具有人参皂苷葡萄糖苷酶的活性.
將人參皂苷葡萄糖苷酶的基因亞剋隆到大腸桿菌錶達載體pET32a(+)中,構建重組質粒,併轉化至大腸桿菌BL21( DE3)中.對該基因進行誘導錶達,併對包涵體進行變性和複性.結果顯示,經終濃度為0.5 mmol/L IPTG在30℃下誘導錶達4h,進行SDS-PAGE分析,目的蛋白主要以包涵體形式存在併確定其分子質量約為75 ku,與理論值基本相符,錶明該基因得到瞭錶達.包涵體經過變性和稀釋複性後,經TLC活性檢測,能夠水解底物Rb1,錶明具有人參皂苷葡萄糖苷酶的活性.
장인삼조감포도당감매적기인아극륭도대장간균표체재체pET32a(+)중,구건중조질립,병전화지대장간균BL21( DE3)중.대해기인진행유도표체,병대포함체진행변성화복성.결과현시,경종농도위0.5 mmol/L IPTG재30℃하유도표체4h,진행SDS-PAGE분석,목적단백주요이포함체형식존재병학정기분자질량약위75 ku,여이론치기본상부,표명해기인득도료표체.포함체경과변성화희석복성후,경TLC활성검측,능구수해저물Rb1,표명구유인삼조감포도당감매적활성.
