福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
4期
227-230
,共4页
黄春%杨明%施晓芸%陈晓春
黃春%楊明%施曉蕓%陳曉春
황춘%양명%시효예%진효춘
缺氧%晚期糖基化终末产物受体%早期生长反应因子-1%蛋白激酶C%内皮细胞%RNA,信使
缺氧%晚期糖基化終末產物受體%早期生長反應因子-1%蛋白激酶C%內皮細胞%RNA,信使
결양%만기당기화종말산물수체%조기생장반응인자-1%단백격매C%내피세포%RNA,신사
目的 观察缺氧对内皮细胞早期生长反应因子(Egr-1)表达的影响及晚期糖基化终末产物(AGEs)及其受体(RAGE)对上述效应的可能调控机制.方法 以培养小鼠主动脉内皮细胞(MAECs)为模型,根据缺氧时间和缺氧前预处理方式,分为不同缺氧时间组[缺氧0(对照组),5,10,15,30,60,120 min组]、anti-AGE预处理组、可溶性RAGE(sRAGE)预处理组和蛋白激酶C(PKC)β抑制剂组,实时定量PCR法检测缺氧后Egr-1 mRNA含量、ELISA法检测细胞裂解液中AGEs含量、蛋白印迹法检测细胞膜蛋白中PKC各异构体的活化.结果 缺氧15 min组Egr-1 mRNA表达上调,为对照组的(14.13±0.77)倍(P=0.000 0);缺氧10~60 min内皮细胞裂解液中AGEs堆积;缺氧15 min组MAECs膜蛋白中PKCβⅡ含量为(30.57±1.86),显著高于对照组的含量(9.22±1.05)(P=0.002);anti-AGE、sRAGE和PKCβ抑制剂预处理减少缺氧诱导的Egr-1 mRNA表达上调(P=0.000 0);anti-AGE和sRAGE预处理显著减少缺氧对PKCβⅡ的活化(P=0.000 0).结论 急性缺氧诱导内皮细胞AGEs堆积、PKCβⅡ活化和Egr-1mRNA高表达,AGEs-RAGE和PKCβII信号参与急性缺氧后Egr-1诱导表达的调控.
目的 觀察缺氧對內皮細胞早期生長反應因子(Egr-1)錶達的影響及晚期糖基化終末產物(AGEs)及其受體(RAGE)對上述效應的可能調控機製.方法 以培養小鼠主動脈內皮細胞(MAECs)為模型,根據缺氧時間和缺氧前預處理方式,分為不同缺氧時間組[缺氧0(對照組),5,10,15,30,60,120 min組]、anti-AGE預處理組、可溶性RAGE(sRAGE)預處理組和蛋白激酶C(PKC)β抑製劑組,實時定量PCR法檢測缺氧後Egr-1 mRNA含量、ELISA法檢測細胞裂解液中AGEs含量、蛋白印跡法檢測細胞膜蛋白中PKC各異構體的活化.結果 缺氧15 min組Egr-1 mRNA錶達上調,為對照組的(14.13±0.77)倍(P=0.000 0);缺氧10~60 min內皮細胞裂解液中AGEs堆積;缺氧15 min組MAECs膜蛋白中PKCβⅡ含量為(30.57±1.86),顯著高于對照組的含量(9.22±1.05)(P=0.002);anti-AGE、sRAGE和PKCβ抑製劑預處理減少缺氧誘導的Egr-1 mRNA錶達上調(P=0.000 0);anti-AGE和sRAGE預處理顯著減少缺氧對PKCβⅡ的活化(P=0.000 0).結論 急性缺氧誘導內皮細胞AGEs堆積、PKCβⅡ活化和Egr-1mRNA高錶達,AGEs-RAGE和PKCβII信號參與急性缺氧後Egr-1誘導錶達的調控.
목적 관찰결양대내피세포조기생장반응인자(Egr-1)표체적영향급만기당기화종말산물(AGEs)급기수체(RAGE)대상술효응적가능조공궤제.방법 이배양소서주동맥내피세포(MAECs)위모형,근거결양시간화결양전예처리방식,분위불동결양시간조[결양0(대조조),5,10,15,30,60,120 min조]、anti-AGE예처리조、가용성RAGE(sRAGE)예처리조화단백격매C(PKC)β억제제조,실시정량PCR법검측결양후Egr-1 mRNA함량、ELISA법검측세포렬해액중AGEs함량、단백인적법검측세포막단백중PKC각이구체적활화.결과 결양15 min조Egr-1 mRNA표체상조,위대조조적(14.13±0.77)배(P=0.000 0);결양10~60 min내피세포렬해액중AGEs퇴적;결양15 min조MAECs막단백중PKCβⅡ함량위(30.57±1.86),현저고우대조조적함량(9.22±1.05)(P=0.002);anti-AGE、sRAGE화PKCβ억제제예처리감소결양유도적Egr-1 mRNA표체상조(P=0.000 0);anti-AGE화sRAGE예처리현저감소결양대PKCβⅡ적활화(P=0.000 0).결론 급성결양유도내피세포AGEs퇴적、PKCβⅡ활화화Egr-1mRNA고표체,AGEs-RAGE화PKCβII신호삼여급성결양후Egr-1유도표체적조공.
