中华检验医学杂志
中華檢驗醫學雜誌
중화검험의학잡지
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2004年
10期
642-645
,共4页
黄天谊%黎学铭%刘涛%郭传坤%黄雨婷%林睿
黃天誼%黎學銘%劉濤%郭傳坤%黃雨婷%林睿
황천의%려학명%류도%곽전곤%황우정%림예
疟原虫,间日%聚合酶链反应%基因型%多态性,单核苷酸
瘧原蟲,間日%聚閤酶鏈反應%基因型%多態性,單覈苷痠
학원충,간일%취합매련반응%기인형%다태성,단핵감산
目的对单管-套式多重聚合酶链反应(PCR)鉴定间日疟原虫基因型方法的应用价值进行研究.方法以间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因为模型,综合套式多重PCR、等位特异PCR和标签引物扩增等技术,使用Primer Premier 5.0软件和NCBI的BLAST网络改进与优化引物设计,并用矩阵试验法优化反应条件和程序,同时,用单管-套式多重PCR和套式PCR对71份间日疟患者血标本的间日疟原虫基因型鉴定结果作比较. 结果单管-套式多重PCR可同时扩增出3种不同长度的基因型/族特异片段,且基本消除了二聚体等噪音.用单管-套式多重PCR鉴定检测71份间日疟患者血标本,62份与套式PCR鉴定结果一致,并新发现6份不同基因型和PV-Ⅱ型的混合感染;还将2份套式PCR鉴定为热带族的血标本纠正为PV-Ⅱ型,1份阴性血样鉴定为温带族.结论研究建立的单管-套式/多重PCR鉴定间日疟原虫基因型的方法,简化了试验步骤,节省了试剂耗材,消除了PCR噪音,提高了检出间日疟原虫混合感染和低度感染的敏感性;是一种具有发展潜力的检测单核苷酸多态性和基因型鉴定的方法.
目的對單管-套式多重聚閤酶鏈反應(PCR)鑒定間日瘧原蟲基因型方法的應用價值進行研究.方法以間日瘧原蟲環子孢子蛋白(CSP)基因為模型,綜閤套式多重PCR、等位特異PCR和標籤引物擴增等技術,使用Primer Premier 5.0軟件和NCBI的BLAST網絡改進與優化引物設計,併用矩陣試驗法優化反應條件和程序,同時,用單管-套式多重PCR和套式PCR對71份間日瘧患者血標本的間日瘧原蟲基因型鑒定結果作比較. 結果單管-套式多重PCR可同時擴增齣3種不同長度的基因型/族特異片段,且基本消除瞭二聚體等譟音.用單管-套式多重PCR鑒定檢測71份間日瘧患者血標本,62份與套式PCR鑒定結果一緻,併新髮現6份不同基因型和PV-Ⅱ型的混閤感染;還將2份套式PCR鑒定為熱帶族的血標本糾正為PV-Ⅱ型,1份陰性血樣鑒定為溫帶族.結論研究建立的單管-套式/多重PCR鑒定間日瘧原蟲基因型的方法,簡化瞭試驗步驟,節省瞭試劑耗材,消除瞭PCR譟音,提高瞭檢齣間日瘧原蟲混閤感染和低度感染的敏感性;是一種具有髮展潛力的檢測單覈苷痠多態性和基因型鑒定的方法.
목적대단관-투식다중취합매련반응(PCR)감정간일학원충기인형방법적응용개치진행연구.방법이간일학원충배자포자단백(CSP)기인위모형,종합투식다중PCR、등위특이PCR화표첨인물확증등기술,사용Primer Premier 5.0연건화NCBI적BLAST망락개진여우화인물설계,병용구진시험법우화반응조건화정서,동시,용단관-투식다중PCR화투식PCR대71빈간일학환자혈표본적간일학원충기인형감정결과작비교. 결과단관-투식다중PCR가동시확증출3충불동장도적기인형/족특이편단,차기본소제료이취체등조음.용단관-투식다중PCR감정검측71빈간일학환자혈표본,62빈여투식PCR감정결과일치,병신발현6빈불동기인형화PV-Ⅱ형적혼합감염;환장2빈투식PCR감정위열대족적혈표본규정위PV-Ⅱ형,1빈음성혈양감정위온대족.결론연구건립적단관-투식/다중PCR감정간일학원충기인형적방법,간화료시험보취,절성료시제모재,소제료PCR조음,제고료검출간일학원충혼합감염화저도감염적민감성;시일충구유발전잠력적검측단핵감산다태성화기인형감정적방법.
