化学学报
化學學報
화학학보
ACTA CHIMICA SINICA
2004年
3期
274-278
,共5页
黄艳萍%孔德明%张晓滨%沈含熙%宓怀风
黃豔萍%孔德明%張曉濱%瀋含熙%宓懷風
황염평%공덕명%장효빈%침함희%복부풍
复合式蝎形引物%端粒酶%实时检测%聚合酶链式反应(PCR)
複閤式蝎形引物%耑粒酶%實時檢測%聚閤酶鏈式反應(PCR)
복합식갈형인물%단립매%실시검측%취합매련식반응(PCR)
针对端粒酶延伸产物中靶基因序列的特殊性,开发了一种可产生荧光的复合式蝎形引物,该引物的5′端带有可特异性检测靶基因的探针序列,PCR阻断剂将其与引物序列连接.当复合式蝎形引物延伸,探针序列与同一分子内的靶基因杂交,荧光信号产生.运用该技术,建立了定量检测端粒酶延伸产物的实时荧光PCR方法.该法可在快速PCR循环条件下,对0.15～1.50×103 amol/μL范围内的样品进行定量检测,线性相关系数R2=0.9992.该法操作简便,无需PCR后额外的检测步骤.
針對耑粒酶延伸產物中靶基因序列的特殊性,開髮瞭一種可產生熒光的複閤式蝎形引物,該引物的5′耑帶有可特異性檢測靶基因的探針序列,PCR阻斷劑將其與引物序列連接.噹複閤式蝎形引物延伸,探針序列與同一分子內的靶基因雜交,熒光信號產生.運用該技術,建立瞭定量檢測耑粒酶延伸產物的實時熒光PCR方法.該法可在快速PCR循環條件下,對0.15～1.50×103 amol/μL範圍內的樣品進行定量檢測,線性相關繫數R2=0.9992.該法操作簡便,無需PCR後額外的檢測步驟.
침대단립매연신산물중파기인서렬적특수성,개발료일충가산생형광적복합식갈형인물,해인물적5′단대유가특이성검측파기인적탐침서렬,PCR조단제장기여인물서렬련접.당복합식갈형인물연신,탐침서렬여동일분자내적파기인잡교,형광신호산생.운용해기술,건립료정량검측단립매연신산물적실시형광PCR방법.해법가재쾌속PCR순배조건하,대0.15～1.50×103 amol/μL범위내적양품진행정량검측,선성상관계수R2=0.9992.해법조작간편,무수PCR후액외적검측보취.
