CAJ | 학술논문

目的利用线粒体DNA(mtDNA)上细胞色素氧化酶辅酶Ⅱ(COⅡ)中635bp基因序列,解决嗜尸性苍蝇及其卵和幼虫种类鉴定的难题.方法随机采集放置在呼和浩特地区室外草地家兔尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、苍蝇腹中的卵.利用Chelex方法提取上述苍蝇mtDNA;通过Perkin-Elmer 9600扩增仪进行PCR扩增;琼脂糖水平电泳和银染显色技术进行扩增结果检测;PCR胶回收试剂盒纯化;ABI 377测序仪测序;DNAMAN 4.0序列分析软件,进行序列比对,截取等长度片段;MEGA2.1软件包进行序列分析和构建系统发育树.结果上述嗜尸性苍蝇mtDNA上COⅡ基因序列在双翅目嗜尸性苍蝇的种内差异均数小于1%,种间差异均数大于3%,成虫与幼虫、卵无明显差异.以此能够根据COⅡ序列差异判断两个个体是否同种.然而,对于亲缘关系非常接近的铜绿蝇和丝光绿蝇来说,由于二者的种内、种间进化分歧均数非常接近,运用上述两个片段则很难区别.结论 mtDNA上COⅡ序列分析能有效地对绝大多数嗜尸性苍蝇进行种类鉴定.该检测方法快速、简便和精确,能作为法医鉴别嗜尸性苍蝇种类的依据.
목적이용선립체DNA(mtDNA)상세포색소양화매보매Ⅱ(COⅡ)중635bp기인서렬,해결기시성창승급기란화유충충류감정적난제.방법수궤채집방치재호화호특지구실외초지가토시체상적기시성창승、유충、창승복중적란.이용Chelex방법제취상술창승mtDNA;통과Perkin-Elmer 9600확증의진행PCR확증;경지당수평전영화은염현색기술진행확증결과검측;PCR효회수시제합순화;ABI 377측서의측서;DNAMAN 4.0서렬분석연건,진행서렬비대,절취등장도편단;MEGA2.1연건포진행서렬분석화구건계통발육수.결과상술기시성창승mtDNA상COⅡ기인서렬재쌍시목기시성창승적충내차이균수소우1%,충간차이균수대우3%,성충여유충、란무명현차이.이차능구근거COⅡ서렬차이판단량개개체시부동충.연이,대우친연관계비상접근적동록승화사광록승래설,유우이자적충내、충간진화분기균수비상접근,운용상술량개편단칙흔난구별.결론 mtDNA상COⅡ서렬분석능유효지대절대다수기시성창승진행충류감정.해검측방법쾌속、간편화정학,능작위법의감별기시성창승충류적의거.