临床检验杂志
臨床檢驗雜誌
림상검험잡지
2005年
6期
408-411
,共4页
彭方毅%张青云%周柔丽%涂植光%王雅明%徐建军
彭方毅%張青雲%週柔麗%塗植光%王雅明%徐建軍
팽방의%장청운%주유려%도식광%왕아명%서건군
溶酶体相关4次跨膜蛋白B(LAPTM4B)%肝癌%单克隆抗体
溶酶體相關4次跨膜蛋白B(LAPTM4B)%肝癌%單剋隆抗體
용매체상관4차과막단백B(LAPTM4B)%간암%단극륭항체
目的利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达.方法重组质粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1 mmol/L IPTG 37℃诱导获得融合蛋白.利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达.结果经western blot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B-N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合.免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白.IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达.结论该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件.
目的利用製備的鼠抗人肝癌相關LAPTM4B蛋白的單剋隆抗體,檢測LAPTM4B蛋白在不同腫瘤細胞中的錶達.方法重組質粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99經酶切及測序鑒定正確後,1 mmol/L IPTG 37℃誘導穫得融閤蛋白.利用親和層析方法純化抗人LAPTM4B單抗,免疫印跡法進行單抗鑒定,免疫細胞化學染色法檢測5種腫瘤細胞中LAPTM4B的錶達.結果經western blot分析抗LAPTM4B單抗可與LAPTM4B-N1-99編碼的融閤蛋白以及腫瘤細胞中的天然蛋白特異性結閤.免疫細胞化學染色(IHC)檢測到肝癌、肺癌等5種腫瘤細胞均錶達LAPTM4B蛋白.IHC和免疫印跡分析證明瞭LAPTM4B蛋白在腫瘤細胞中的錶達.結論該單抗能特異識彆原覈及真覈細胞錶達的LAPTM4B蛋白,為進一步探討LAPTM4B蛋白的生物學效應提供瞭條件.
목적이용제비적서항인간암상관LAPTM4B단백적단극륭항체,검측LAPTM4B단백재불동종류세포중적표체.방법중조질립pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99경매절급측서감정정학후,1 mmol/L IPTG 37℃유도획득융합단백.이용친화층석방법순화항인LAPTM4B단항,면역인적법진행단항감정,면역세포화학염색법검측5충종류세포중LAPTM4B적표체.결과경western blot분석항LAPTM4B단항가여LAPTM4B-N1-99편마적융합단백이급종류세포중적천연단백특이성결합.면역세포화학염색(IHC)검측도간암、폐암등5충종류세포균표체LAPTM4B단백.IHC화면역인적분석증명료LAPTM4B단백재종류세포중적표체.결론해단항능특이식별원핵급진핵세포표체적LAPTM4B단백,위진일보탐토LAPTM4B단백적생물학효응제공료조건.
