CAJ | 학술논문

目的在体外成功分离培养并扩增神经干细胞(NSCs)的基础上,研究外源性血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)对NSCs向多巴胺(DA)能神经元分化的影响.方法 (1)分离培养新生1 d SD大鼠脑组织NSCs,免疫细胞学方法测定NSCs特异性标志物神经上皮干细胞蛋白(Nestin)表达及其分化为神经元、神经胶质细胞的能力;(2)按培养液中Ang Ⅱ的浓度不同,分5个浓度(100、200、400、600、800 nmol/L)对第二代NSCs进行诱导分化.10 d后采用免疫细胞学方法检测DA能神经元标志物酪氨酸羟化酶(TH)和神经胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,半定量RT-PCR(SQ-PCR)测定分化细胞中TH mRNA的相对表达量.结果外源性Ang Ⅱ诱导提高NSCs向TH阳性细胞分化的比率,TH mRNA相对表达量亦增加,以Ang Ⅱ浓度为400 nmol/L及600 nmol/L的诱导效果最明显,TH阳性细胞率分别为10.77%和11.34%,TH mRNA相对表达量分别为(0.4023±0.0515)和(0.3971±0.0319),两组间比较无统计学意义(P>0.05);其中400 nmol/L Ang Ⅱ组分化细胞中GFAP阳性细胞率高于对照组,有统计学意义(P<0.05).结论外源性AngⅡ促进NSCs向DA能神经元分化,在400～600 nmol/L浓度范围内AngⅡ的诱导效能更显著;AngⅡ促进NSCs向DA能神经元分化的机制可能与同时促进星型胶质细胞(AS)分化有关.
목적 재체외성공분리배양병확증신경간세포(NSCs)적기출상,연구외원성혈관긴장소Ⅱ(Ang Ⅱ)대NSCs향다파알(DA)능신경원분화적영향.방법 (1)분리배양신생1 d SD대서뇌조직NSCs,면역세포학방법측정NSCs특이성표지물신경상피간세포단백(Nestin)표체급기분화위신경원、신경효질세포적능력;(2)안배양액중Ang Ⅱ적농도불동,분5개농도(100、200、400、600、800 nmol/L)대제이대NSCs진행유도분화.10 d후채용면역세포학방법검측DA능신경원표지물락안산간화매(TH)화신경효질세포표지물효질섬유산성단백(GFAP)적표체,반정량RT-PCR(SQ-PCR)측정분화세포중TH mRNA적상대표체량.결과 외원성Ang Ⅱ유도제고NSCs향TH양성세포분화적비솔,TH mRNA상대표체량역증가,이Ang Ⅱ농도위400 nmol/L급600 nmol/L적유도효과최명현,TH양성세포솔분별위10.77%화11.34%,TH mRNA상대표체량분별위(0.4023±0.0515)화(0.3971±0.0319),량조간비교무통계학의의(P>0.05);기중400 nmol/L Ang Ⅱ조분화세포중GFAP양성세포솔고우대조조,유통계학의의(P<0.05).결론 외원성AngⅡ촉진NSCs향DA능신경원분화,재400～600 nmol/L농도범위내AngⅡ적유도효능경현저;AngⅡ촉진NSCs향DA능신경원분화적궤제가능여동시촉진성형효질세포(AS)분화유관.