林业科技开发
林業科技開髮
임업과기개발
CHINA FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
5期
64-67
,共4页
赵虎%王玉%王晓燊%洑香香
趙虎%王玉%王曉燊%洑香香
조호%왕옥%왕효신%보향향
松属%ISSR-PCR%扩增体系优化%鉴别
鬆屬%ISSR-PCR%擴增體繫優化%鑒彆
송속%ISSR-PCR%확증체계우화%감별
对松属部分种的ISSR-PCR的反应体系及扩增程序进行优化,并进行种质鉴别.优化的10 μL扩增体系为:Taq酶0.5 U,10×Buffer(Mg2+ free) ,dNTP 0.35 mmol/L,Mg2+ 2.25 mmol/L,20ng DNA ,0.8 μL引物.扩增程序为:94℃预变性7 min,然后进行40个循环:94℃变性30 s,56℃退火45 s,72℃延伸2 min;最后72℃延伸7 min,4℃保温.从100条UBC系列引物中筛选出5条特异性强、稳定性好的引物UBC823、UBC840、UBC841、UBC855、UBC873,扩增的特异性条带可对松属的7个种进行鉴别.
對鬆屬部分種的ISSR-PCR的反應體繫及擴增程序進行優化,併進行種質鑒彆.優化的10 μL擴增體繫為:Taq酶0.5 U,10×Buffer(Mg2+ free) ,dNTP 0.35 mmol/L,Mg2+ 2.25 mmol/L,20ng DNA ,0.8 μL引物.擴增程序為:94℃預變性7 min,然後進行40箇循環:94℃變性30 s,56℃退火45 s,72℃延伸2 min;最後72℃延伸7 min,4℃保溫.從100條UBC繫列引物中篩選齣5條特異性彊、穩定性好的引物UBC823、UBC840、UBC841、UBC855、UBC873,擴增的特異性條帶可對鬆屬的7箇種進行鑒彆.
대송속부분충적ISSR-PCR적반응체계급확증정서진행우화,병진행충질감별.우화적10 μL확증체계위:Taq매0.5 U,10×Buffer(Mg2+ free) ,dNTP 0.35 mmol/L,Mg2+ 2.25 mmol/L,20ng DNA ,0.8 μL인물.확증정서위:94℃예변성7 min,연후진행40개순배:94℃변성30 s,56℃퇴화45 s,72℃연신2 min;최후72℃연신7 min,4℃보온.종100조UBC계렬인물중사선출5조특이성강、은정성호적인물UBC823、UBC840、UBC841、UBC855、UBC873,확증적특이성조대가대송속적7개충진행감별.
