农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2011年
1期
135-141
,共7页
3T3-L1%miR-196a-1%脂肪细胞
3T3-L1%miR-196a-1%脂肪細胞
3T3-L1%miR-196a-1%지방세포
为研究miR-196a-1在脂肪形成中的作用,从3T3-L1细胞基因组中扩增miR-196a-1前体序列,构建miR-196a-1的表达载体,获得稳定表达miR-196a-1的3T3-L1细胞株,成脂诱导后检测脂肪细胞分化关键转录因子的mRNA表达和脂滴累积情况.结果表明,miR-196a-1在3T3-L1细胞分化过程中表达上调,在诱导分化的第2天达到高峰,并在之后的分化过程中恢复到正常水平;稳定表达miR-196a-1的3T3-L1细胞株中miR-196a-1的持续高水平表达导致脂肪形成关键基因过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)和脂蛋白脂酶(LPL)的mRNA水平及脂滴累积明显增加.这些结果指明,miR-196a-1促进3T3-L1脂肪细胞分化,利用所构建的稳定表达miR-196a-1的细胞株可进一步研究miR-196a-1调节脂肪形成的分子机制.
為研究miR-196a-1在脂肪形成中的作用,從3T3-L1細胞基因組中擴增miR-196a-1前體序列,構建miR-196a-1的錶達載體,穫得穩定錶達miR-196a-1的3T3-L1細胞株,成脂誘導後檢測脂肪細胞分化關鍵轉錄因子的mRNA錶達和脂滴纍積情況.結果錶明,miR-196a-1在3T3-L1細胞分化過程中錶達上調,在誘導分化的第2天達到高峰,併在之後的分化過程中恢複到正常水平;穩定錶達miR-196a-1的3T3-L1細胞株中miR-196a-1的持續高水平錶達導緻脂肪形成關鍵基因過氧化物酶體增殖物活化受體γ(PPARγ)、CCAAT/增彊子結閤蛋白α(C/EBPα)和脂蛋白脂酶(LPL)的mRNA水平及脂滴纍積明顯增加.這些結果指明,miR-196a-1促進3T3-L1脂肪細胞分化,利用所構建的穩定錶達miR-196a-1的細胞株可進一步研究miR-196a-1調節脂肪形成的分子機製.
위연구miR-196a-1재지방형성중적작용,종3T3-L1세포기인조중확증miR-196a-1전체서렬,구건miR-196a-1적표체재체,획득은정표체miR-196a-1적3T3-L1세포주,성지유도후검측지방세포분화관건전록인자적mRNA표체화지적루적정황.결과표명,miR-196a-1재3T3-L1세포분화과정중표체상조,재유도분화적제2천체도고봉,병재지후적분화과정중회복도정상수평;은정표체miR-196a-1적3T3-L1세포주중miR-196a-1적지속고수평표체도치지방형성관건기인과양화물매체증식물활화수체γ(PPARγ)、CCAAT/증강자결합단백α(C/EBPα)화지단백지매(LPL)적mRNA수평급지적루적명현증가.저사결과지명,miR-196a-1촉진3T3-L1지방세포분화,이용소구건적은정표체miR-196a-1적세포주가진일보연구miR-196a-1조절지방형성적분자궤제.
