CAJ | 학술논문

目的建立一系列浓度梯度的A型产气荚膜梭菌(clostridium perfringens,C.perfringens)感染小鼠肠道的动物模型,探讨实时荧光定量PCR法对肠道中C.perfringens的检测.方法小鼠随机分成6组,每组10只,依次腹腔注射浓度为5.7×109、5.7×108、5.7×107、5.7×106和5.7×105 cfu/mL的A型C.perfringens菌液1 mL,空白对照组腹腔注射生理盐水1 mL.连续观察72 h,统计小鼠死亡数量、存活时间及腹腔取样做细菌革兰染色涂片镜检、细菌厌氧血平板厌氧培养、测序鉴定和荧光定量PCR定量检测.结果细菌镜检结果为5.7×109、5.7×108 和5.7×107 cfu/mL浓度组在显微镜下能观察到两头钝圆棒状的革兰阳性杆菌,细菌厌氧培养能培养出大量边缘粗糙的菌落;在5.7×106、5.7×105 cfu/mL浓度组和空白对照组不能发现革兰阳性杆菌,利用细菌培养法,5.7×106 cfu/mL组平均能培养出7个菌落,在5.7×105 cfu/mL组和空白对照组不能培养出任何菌落,克隆目的片段测序结果与GeneBank中C.perfringens16S rRNA[AB566417]完全一致.荧光定量PCR法在各浓度组为阳性,空白对照组为阴性.结论荧光定量PCR法在检测C.perfringens具有灵敏度高、特异性好、检验时间短的优点.
목적 건립일계렬농도제도적A형산기협막사균(clostridium perfringens,C.perfringens)감염소서장도적동물모형,탐토실시형광정량PCR법대장도중C.perfringens적검측.방법 소서수궤분성6조,매조10지,의차복강주사농도위5.7×109、5.7×108、5.7×107、5.7×106화5.7×105 cfu/mL적A형C.perfringens균액1 mL,공백대조조복강주사생리염수1 mL.련속관찰72 h,통계소서사망수량、존활시간급복강취양주세균혁란염색도편경검、세균염양혈평판염양배양、측서감정화형광정량PCR정량검측.결과 세균경검결과 위5.7×109、5.7×108 화5.7×107 cfu/mL농도조재현미경하능관찰도량두둔원봉상적혁란양성간균,세균염양배양능배양출대량변연조조적균락;재5.7×106、5.7×105 cfu/mL농도조화공백대조조불능발현혁란양성간균,이용세균배양법,5.7×106 cfu/mL조평균능배양출7개균락,재5.7×105 cfu/mL조화공백대조조불능배양출임하균락,극륭목적 편단측서결과 여GeneBank중C.perfringens16S rRNA[AB566417]완전일치.형광정량PCR법재각농도조위양성,공백대조조위음성.결론 형광정량PCR법재검측C.perfringens구유령민도고、특이성호、검험시간단적우점.