畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
6期
857-864
,共8页
王爱萍%李发弟%胡骁飞%曾巧英%李金录%郭艳丽%赵启法%陈玉梅%范璐
王愛萍%李髮弟%鬍驍飛%曾巧英%李金錄%郭豔麗%趙啟法%陳玉梅%範璐
왕애평%리발제%호효비%증교영%리금록%곽염려%조계법%진옥매%범로
新霉素%单克隆抗体%阻断ELISA%试剂盒
新黴素%單剋隆抗體%阻斷ELISA%試劑盒
신매소%단극륭항체%조단ELISA%시제합
本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒.以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定.结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.990 3;检测范围为1.0～64.0μg·L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.59 μg·L-1,灵敏度为0.75 μg·L-1,检测限为1.0 μg·L1.试剂盒除了和NEO阳性样品反应呈阳性外,与庆大霉素、链霉素、土霉素、沙丁胺醇、环丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他药物均无交叉反应性.奶样、饲料样及肉样的平均添加回收率为89.50%、89.58%和87.92%;平均批内和批间变异系数均小于15%,而且批间变异系数小于批内变异系数;基质对NEO-Kit的检测结果影响比较小;NEO-Kit在4℃可保存6个月以上.试剂盒和HPLC-MS-MS对牛奶中新霉素回收率没有显著差异(P≥0.05).试剂盒和HPLC-MS-MS对饲料样检测结果也无显著差异(P≥0.05).本研究成功研制出敏感、特异、准确的NEO检测试剂盒.
本研究旨在建立新黴素(Neomycin,NEO)免疫學檢測試劑盒.以製備的抗NEO單剋隆抗體(NEO mAb)為基礎,建立阻斷ELISA分析方法,組裝新黴素阻斷ELISA試劑盒,併對試劑盒的性能進行鑒定.結果錶明,NEO試劑盒(NEO-kit)標準麯線呈典型的S型,符閤4參數logit麯線擬閤,相關繫數R2=0.990 3;檢測範圍為1.0～64.0μg·L-1,半數抑製濃度(IC50)為2.59 μg·L-1,靈敏度為0.75 μg·L-1,檢測限為1.0 μg·L1.試劑盒除瞭和NEO暘性樣品反應呈暘性外,與慶大黴素、鏈黴素、土黴素、沙丁胺醇、環丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他藥物均無交扠反應性.奶樣、飼料樣及肉樣的平均添加迴收率為89.50%、89.58%和87.92%;平均批內和批間變異繫數均小于15%,而且批間變異繫數小于批內變異繫數;基質對NEO-Kit的檢測結果影響比較小;NEO-Kit在4℃可保存6箇月以上.試劑盒和HPLC-MS-MS對牛奶中新黴素迴收率沒有顯著差異(P≥0.05).試劑盒和HPLC-MS-MS對飼料樣檢測結果也無顯著差異(P≥0.05).本研究成功研製齣敏感、特異、準確的NEO檢測試劑盒.
본연구지재건립신매소(Neomycin,NEO)면역학검측시제합.이제비적항NEO단극륭항체(NEO mAb)위기출,건립조단ELISA분석방법,조장신매소조단ELISA시제합,병대시제합적성능진행감정.결과표명,NEO시제합(NEO-kit)표준곡선정전형적S형,부합4삼수logit곡선의합,상관계수R2=0.990 3;검측범위위1.0～64.0μg·L-1,반수억제농도(IC50)위2.59 μg·L-1,령민도위0.75 μg·L-1,검측한위1.0 μg·L1.시제합제료화NEO양성양품반응정양성외,여경대매소、련매소、토매소、사정알순、배병사성、이불사성、광알밀정급광알갑오서등기타약물균무교차반응성.내양、사료양급육양적평균첨가회수솔위89.50%、89.58%화87.92%;평균비내화비간변이계수균소우15%,이차비간변이계수소우비내변이계수;기질대NEO-Kit적검측결과영향비교소;NEO-Kit재4℃가보존6개월이상.시제합화HPLC-MS-MS대우내중신매소회수솔몰유현저차이(P≥0.05).시제합화HPLC-MS-MS대사료양검측결과야무현저차이(P≥0.05).본연구성공연제출민감、특이、준학적NEO검측시제합.
