生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
3期
75-79
,共5页
全先庆%高成香%王兴军%赵传志
全先慶%高成香%王興軍%趙傳誌
전선경%고성향%왕흥군%조전지
花生(Arachis hypogaeaL.)%金属硫蛋白%基因克隆%表达分析
花生(Arachis hypogaeaL.)%金屬硫蛋白%基因剋隆%錶達分析
화생(Arachis hypogaeaL.)%금속류단백%기인극륭%표체분석
以鲁花14号花生为材料,从花生cDNA文库和基因组中筛选和克隆了花生的金属硫蛋白基因AhMT3a.该基因全长785 bp,有2个内含子,开放阅读框由201个碱基组成,编码66个氨基酸,其中包含13个半胱氨酸(Cys),预测其分子量为6.83kD,等电点为4.59.运用生物信息学手段对AhMT3a蛋白的信号肽、跨膜区、亚细胞定位和疏水性进行了预测.与拟南芥、棉花和草莓等植物type 3 MTs的序列比对结果表明,花生和其他不同植物的MT3在氨基酸序列上具有较高的同源性,从系统发育树中可以看出AhMT3a和蒿麦的金属硫蛋白亲缘关系较近.半定量RT-PCR和芯片杂交结果显示花生AhMT3a在花中表达量最高,在种子中表达量最低；在ABA、NaCl及PEG等不同处理下,表达量变化不大.
以魯花14號花生為材料,從花生cDNA文庫和基因組中篩選和剋隆瞭花生的金屬硫蛋白基因AhMT3a.該基因全長785 bp,有2箇內含子,開放閱讀框由201箇堿基組成,編碼66箇氨基痠,其中包含13箇半胱氨痠(Cys),預測其分子量為6.83kD,等電點為4.59.運用生物信息學手段對AhMT3a蛋白的信號肽、跨膜區、亞細胞定位和疏水性進行瞭預測.與擬南芥、棉花和草莓等植物type 3 MTs的序列比對結果錶明,花生和其他不同植物的MT3在氨基痠序列上具有較高的同源性,從繫統髮育樹中可以看齣AhMT3a和蒿麥的金屬硫蛋白親緣關繫較近.半定量RT-PCR和芯片雜交結果顯示花生AhMT3a在花中錶達量最高,在種子中錶達量最低；在ABA、NaCl及PEG等不同處理下,錶達量變化不大.
이로화14호화생위재료,종화생cDNA문고화기인조중사선화극륭료화생적금속류단백기인AhMT3a.해기인전장785 bp,유2개내함자,개방열독광유201개감기조성,편마66개안기산,기중포함13개반광안산(Cys),예측기분자량위6.83kD,등전점위4.59.운용생물신식학수단대AhMT3a단백적신호태、과막구、아세포정위화소수성진행료예측.여의남개、면화화초매등식물type 3 MTs적서렬비대결과표명,화생화기타불동식물적MT3재안기산서렬상구유교고적동원성,종계통발육수중가이간출AhMT3a화호맥적금속류단백친연관계교근.반정량RT-PCR화심편잡교결과현시화생AhMT3a재화중표체량최고,재충자중표체량최저；재ABA、NaCl급PEG등불동처리하,표체량변화불대.
