生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2006年
1期
24-26
,共3页
陈竞新%王会中%詹林盛%王全立
陳競新%王會中%詹林盛%王全立
진경신%왕회중%첨림성%왕전립
脂联素%脂联素球状区%可溶性表达%抗体
脂聯素%脂聯素毬狀區%可溶性錶達%抗體
지련소%지련소구상구%가용성표체%항체
目的:克隆表达有生物学活性的脂联素及其球状区蛋白,并制备抗体.方法:以pQE30-adiponectin质粒为模板,PCR扩增脂联素及其球状区蛋白基因片段,插入pGEX-4T-2载体,转化大肠杆菌BL21后获得表达,用GSTrap柱亲和纯化可溶性表达的蛋白.用纯化的蛋白免疫家兔制备多抗,Western blot鉴定抗体与人血清中脂联素的反应性.结果:PCR扩增脂联素基因片段长约710 bp,脂联素球状区基因片段长约430 bp.表达的GST-脂联素融合蛋白表观Mr约51 000,GST-脂联素球状区融合蛋白表观Mr约42 000,纯化后纯度高于90%.免疫产生的抗体与人血清中的脂联素能特异性结合.结论:表达获得的脂联素蛋白和制备的抗体为脂联素的检测及对其功能的研究奠定了基础.
目的:剋隆錶達有生物學活性的脂聯素及其毬狀區蛋白,併製備抗體.方法:以pQE30-adiponectin質粒為模闆,PCR擴增脂聯素及其毬狀區蛋白基因片段,插入pGEX-4T-2載體,轉化大腸桿菌BL21後穫得錶達,用GSTrap柱親和純化可溶性錶達的蛋白.用純化的蛋白免疫傢兔製備多抗,Western blot鑒定抗體與人血清中脂聯素的反應性.結果:PCR擴增脂聯素基因片段長約710 bp,脂聯素毬狀區基因片段長約430 bp.錶達的GST-脂聯素融閤蛋白錶觀Mr約51 000,GST-脂聯素毬狀區融閤蛋白錶觀Mr約42 000,純化後純度高于90%.免疫產生的抗體與人血清中的脂聯素能特異性結閤.結論:錶達穫得的脂聯素蛋白和製備的抗體為脂聯素的檢測及對其功能的研究奠定瞭基礎.
목적:극륭표체유생물학활성적지련소급기구상구단백,병제비항체.방법:이pQE30-adiponectin질립위모판,PCR확증지련소급기구상구단백기인편단,삽입pGEX-4T-2재체,전화대장간균BL21후획득표체,용GSTrap주친화순화가용성표체적단백.용순화적단백면역가토제비다항,Western blot감정항체여인혈청중지련소적반응성.결과:PCR확증지련소기인편단장약710 bp,지련소구상구기인편단장약430 bp.표체적GST-지련소융합단백표관Mr약51 000,GST-지련소구상구융합단백표관Mr약42 000,순화후순도고우90%.면역산생적항체여인혈청중적지련소능특이성결합.결론:표체획득적지련소단백화제비적항체위지련소적검측급대기공능적연구전정료기출.
