细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2006年
2期
181-184
,共4页
孔毅荣%付玲%郭强%于婷%于长明%陈薇
孔毅榮%付玲%郭彊%于婷%于長明%陳薇
공의영%부령%곽강%우정%우장명%진미
MAGE3%炭疽毒素%融合表达%肿瘤免疫治疗
MAGE3%炭疽毒素%融閤錶達%腫瘤免疫治療
MAGE3%탄저독소%융합표체%종류면역치료
目的: 表达融合蛋白LFn-MAGE3, 探讨无毒炭疽毒素用于治疗肿瘤的可能性.方法: 将LFn的编码序列导入PET21a表达载体中, 构建LFn融合表达载体PET21a-LFn.将全长MAGE-3基因插LFn融合表达载体中, 构建了PET21a-LFn-MAGE3融合蛋白表达载体.将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中, 诱导表达LFn-MAGE3融合蛋白.表达产物用Q sepharose FF离子交换柱和Phe HP疏水柱进行纯化.LF毒性抑制实验和细胞免疫荧光实验检测融合蛋白的生物学活性.结果: 融合蛋白LFn-MAGE3在大肠杆菌BL21a获得胞内可溶性表达, 经纯化后, 获得一定纯度的LFn-MAGE3融合蛋白.细胞免疫荧光实验显示LFn-MAGE3能在PA(炭疽保护性抗原)协同下高效进入巨噬细胞.结论: 表达纯化获得的LFn-MAGE3融合蛋白能在PA协助高效进入细胞, 可以用于下一步的肿瘤免疫治疗的动物实验中.
目的: 錶達融閤蛋白LFn-MAGE3, 探討無毒炭疽毒素用于治療腫瘤的可能性.方法: 將LFn的編碼序列導入PET21a錶達載體中, 構建LFn融閤錶達載體PET21a-LFn.將全長MAGE-3基因插LFn融閤錶達載體中, 構建瞭PET21a-LFn-MAGE3融閤蛋白錶達載體.將該重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)中, 誘導錶達LFn-MAGE3融閤蛋白.錶達產物用Q sepharose FF離子交換柱和Phe HP疏水柱進行純化.LF毒性抑製實驗和細胞免疫熒光實驗檢測融閤蛋白的生物學活性.結果: 融閤蛋白LFn-MAGE3在大腸桿菌BL21a穫得胞內可溶性錶達, 經純化後, 穫得一定純度的LFn-MAGE3融閤蛋白.細胞免疫熒光實驗顯示LFn-MAGE3能在PA(炭疽保護性抗原)協同下高效進入巨噬細胞.結論: 錶達純化穫得的LFn-MAGE3融閤蛋白能在PA協助高效進入細胞, 可以用于下一步的腫瘤免疫治療的動物實驗中.
목적: 표체융합단백LFn-MAGE3, 탐토무독탄저독소용우치료종류적가능성.방법: 장LFn적편마서렬도입PET21a표체재체중, 구건LFn융합표체재체PET21a-LFn.장전장MAGE-3기인삽LFn융합표체재체중, 구건료PET21a-LFn-MAGE3융합단백표체재체.장해중조질립전화대장간균BL21(DE3)중, 유도표체LFn-MAGE3융합단백.표체산물용Q sepharose FF리자교환주화Phe HP소수주진행순화.LF독성억제실험화세포면역형광실험검측융합단백적생물학활성.결과: 융합단백LFn-MAGE3재대장간균BL21a획득포내가용성표체, 경순화후, 획득일정순도적LFn-MAGE3융합단백.세포면역형광실험현시LFn-MAGE3능재PA(탄저보호성항원)협동하고효진입거서세포.결론: 표체순화획득적LFn-MAGE3융합단백능재PA협조고효진입세포, 가이용우하일보적종류면역치료적동물실험중.
