南开大学学报（自然科学版）
南開大學學報（自然科學版）
남개대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
2期
51-57
,共7页
孙艳香%杨红梅%耿云红%朱晔荣%王宁宁%王勇
孫豔香%楊紅梅%耿雲紅%硃曄榮%王寧寧%王勇
손염향%양홍매%경운홍%주엽영%왕저저%왕용
百脉根%根癌农杆菌%遗传转化%苗龄%AS%负压处理
百脈根%根癌農桿菌%遺傳轉化%苗齡%AS%負壓處理
백맥근%근암농간균%유전전화%묘령%AS%부압처리
百脉根(Lotus corniculatus L.)是世界著名的多年生优良豆科牧草之一,也是常见的庭院观赏植物.本文通过比较不同根癌农杆菌转化百脉根的效率和优化百脉根子叶遗传转化的条件,建立了一套有效的遗传转化体系.实验结果表明,EHA105作为宿主菌对百脉根进行转化较LBA4404和GV3101具有更高的转化率;5 d苗龄的子叶最适合作为转化的外植体;浸染过程中0.05 MPa负压处理5 mim以及在共培养培养基中添加20 mg/L的乙酰丁香酮均可提高转化效率.卡那霉素抗性植株经3次选择继代培养后,PCR检测全部为阳性.对部分PCR阳性植株进行PCR-Southern杂交,证实PCR产物真实可靠,表明外源基因已整合进入百脉根基因组中.
百脈根(Lotus corniculatus L.)是世界著名的多年生優良豆科牧草之一,也是常見的庭院觀賞植物.本文通過比較不同根癌農桿菌轉化百脈根的效率和優化百脈根子葉遺傳轉化的條件,建立瞭一套有效的遺傳轉化體繫.實驗結果錶明,EHA105作為宿主菌對百脈根進行轉化較LBA4404和GV3101具有更高的轉化率;5 d苗齡的子葉最適閤作為轉化的外植體;浸染過程中0.05 MPa負壓處理5 mim以及在共培養培養基中添加20 mg/L的乙酰丁香酮均可提高轉化效率.卡那黴素抗性植株經3次選擇繼代培養後,PCR檢測全部為暘性.對部分PCR暘性植株進行PCR-Southern雜交,證實PCR產物真實可靠,錶明外源基因已整閤進入百脈根基因組中.
백맥근(Lotus corniculatus L.)시세계저명적다년생우량두과목초지일,야시상견적정원관상식물.본문통과비교불동근암농간균전화백맥근적효솔화우화백맥근자협유전전화적조건,건립료일투유효적유전전화체계.실험결과표명,EHA105작위숙주균대백맥근진행전화교LBA4404화GV3101구유경고적전화솔;5 d묘령적자협최괄합작위전화적외식체;침염과정중0.05 MPa부압처리5 mim이급재공배양배양기중첨가20 mg/L적을선정향동균가제고전화효솔.잡나매소항성식주경3차선택계대배양후,PCR검측전부위양성.대부분PCR양성식주진행PCR-Southern잡교,증실PCR산물진실가고,표명외원기인이정합진입백맥근기인조중.
