细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2008年
2期
196-200
,共5页
沈鑫烽%申宝玲%黄燕燕%余雪娇%彭颖%吕建新
瀋鑫烽%申寶玲%黃燕燕%餘雪嬌%彭穎%呂建新
침흠봉%신보령%황연연%여설교%팽영%려건신
7型腺病毒%E1A基因%克隆%真核表达
7型腺病毒%E1A基因%剋隆%真覈錶達
7형선병독%E1A기인%극륭%진핵표체
为了研究7型腺病毒(Ad7)E1A在感染中的致病机制,分离了Ad7d2病毒株,构建了Ad7 E1A基因的真核表达体系.用A549细胞分离培养痰液标本中的腺病毒,应用重叠延伸PCR扩增Ad7 E1A基因外显子,产物克隆至真核表达载体pIRES-Neo,构建重组子pIRES-Neo-Ad7E1A并转染A549细胞,利用Western印迹对其表达产物进行鉴定.克隆测序显示扩增的Ad7 E1A基因外显子包含了完整的编码区基因,pIRES-Neo-Ad7E1A转染A549细胞的表达产物经Western印迹鉴定与设计相符.成功建立了Ad7 E1A 基因的真核表达体系.
為瞭研究7型腺病毒(Ad7)E1A在感染中的緻病機製,分離瞭Ad7d2病毒株,構建瞭Ad7 E1A基因的真覈錶達體繫.用A549細胞分離培養痰液標本中的腺病毒,應用重疊延伸PCR擴增Ad7 E1A基因外顯子,產物剋隆至真覈錶達載體pIRES-Neo,構建重組子pIRES-Neo-Ad7E1A併轉染A549細胞,利用Western印跡對其錶達產物進行鑒定.剋隆測序顯示擴增的Ad7 E1A基因外顯子包含瞭完整的編碼區基因,pIRES-Neo-Ad7E1A轉染A549細胞的錶達產物經Western印跡鑒定與設計相符.成功建立瞭Ad7 E1A 基因的真覈錶達體繫.
위료연구7형선병독(Ad7)E1A재감염중적치병궤제,분리료Ad7d2병독주,구건료Ad7 E1A기인적진핵표체체계.용A549세포분리배양담액표본중적선병독,응용중첩연신PCR확증Ad7 E1A기인외현자,산물극륭지진핵표체재체pIRES-Neo,구건중조자pIRES-Neo-Ad7E1A병전염A549세포,이용Western인적대기표체산물진행감정.극륭측서현시확증적Ad7 E1A기인외현자포함료완정적편마구기인,pIRES-Neo-Ad7E1A전염A549세포적표체산물경Western인적감정여설계상부.성공건립료Ad7 E1A 기인적진핵표체체계.
