中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2008年
3期
20-23
,共4页
许如苏%林彩华%蔡颖%李辉%杨梓坚%陈冠武
許如囌%林綵華%蔡穎%李輝%楊梓堅%陳冠武
허여소%림채화%채영%리휘%양재견%진관무
沙门氏菌%大肠杆菌O157:H7%双重荧光PCR
沙門氏菌%大腸桿菌O157:H7%雙重熒光PCR
사문씨균%대장간균O157:H7%쌍중형광PCR
目的 建立一种能同时检测沙门氏菌和大肠杆菌157:H7的双重荧光PCR方法,应用于动物源性食品的快速检验.方法 根据沙门氏菌invA基因和大肠杆菌O157:H7 RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应条件,建立可同时检测沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的双重荧光PCR方法,应用于动物源性食品的检验,并与miniVIDAS快速初筛方法和SN标准方法进行比较.结果 本研究建立的双重荧光PCR方法可同时快速检测沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7,对纯菌的检测灵敏度均低于10CFU/双重荧光PCR反应体系.应用本方法检测36株标准/参考菌株,结果只有9株目的菌标准/参考菌株出现特异性扩增,其余27株非目的菌均呈阴性反应.定量检测重复性试验结果,批内和批间的变异系数均小于2%.应用本方法检测人工染菌样品,结果与miniVIDAS和SN方法检测结果一致,但检测时间比miniVIDAS快了3倍,比SN标准快了10多倍.结论 本研究建立的双重荧光PCR方法具有快速、灵敏、特异、重复性好的优点,可在8小时内完成样品沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的检验.
目的 建立一種能同時檢測沙門氏菌和大腸桿菌157:H7的雙重熒光PCR方法,應用于動物源性食品的快速檢驗.方法 根據沙門氏菌invA基因和大腸桿菌O157:H7 RFBE基因的保守序列,設計引物和探針,通過優化反應條件,建立可同時檢測沙門氏菌和大腸桿菌O157:H7的雙重熒光PCR方法,應用于動物源性食品的檢驗,併與miniVIDAS快速初篩方法和SN標準方法進行比較.結果 本研究建立的雙重熒光PCR方法可同時快速檢測沙門氏菌和大腸桿菌O157:H7,對純菌的檢測靈敏度均低于10CFU/雙重熒光PCR反應體繫.應用本方法檢測36株標準/參攷菌株,結果隻有9株目的菌標準/參攷菌株齣現特異性擴增,其餘27株非目的菌均呈陰性反應.定量檢測重複性試驗結果,批內和批間的變異繫數均小于2%.應用本方法檢測人工染菌樣品,結果與miniVIDAS和SN方法檢測結果一緻,但檢測時間比miniVIDAS快瞭3倍,比SN標準快瞭10多倍.結論 本研究建立的雙重熒光PCR方法具有快速、靈敏、特異、重複性好的優點,可在8小時內完成樣品沙門氏菌和大腸桿菌O157:H7的檢驗.
목적 건립일충능동시검측사문씨균화대장간균157:H7적쌍중형광PCR방법,응용우동물원성식품적쾌속검험.방법 근거사문씨균invA기인화대장간균O157:H7 RFBE기인적보수서렬,설계인물화탐침,통과우화반응조건,건립가동시검측사문씨균화대장간균O157:H7적쌍중형광PCR방법,응용우동물원성식품적검험,병여miniVIDAS쾌속초사방법화SN표준방법진행비교.결과 본연구건립적쌍중형광PCR방법가동시쾌속검측사문씨균화대장간균O157:H7,대순균적검측령민도균저우10CFU/쌍중형광PCR반응체계.응용본방법검측36주표준/삼고균주,결과지유9주목적균표준/삼고균주출현특이성확증,기여27주비목적균균정음성반응.정량검측중복성시험결과,비내화비간적변이계수균소우2%.응용본방법검측인공염균양품,결과여miniVIDAS화SN방법검측결과일치,단검측시간비miniVIDAS쾌료3배,비SN표준쾌료10다배.결론 본연구건립적쌍중형광PCR방법구유쾌속、령민、특이、중복성호적우점,가재8소시내완성양품사문씨균화대장간균O157:H7적검험.
