植物学通报
植物學通報
식물학통보
CHINESE BULLETIN OF BOTANY
2008年
2期
167-175
,共9页
姜廷波%唐鑫华%李凤娟%丁宝建%陈虹
薑廷波%唐鑫華%李鳳娟%丁寶建%陳虹
강정파%당흠화%리봉연%정보건%진홍
铁蛋白%基因表达%转基因%大豆%烟草
鐵蛋白%基因錶達%轉基因%大豆%煙草
철단백%기인표체%전기인%대두%연초
铁是植物生长发育的必需元素.由于土壤中的三价铁离子不能被植物直接利用, 使一些植物经常表现出缺铁症状.为探讨利用铁蛋白基因提高植物耐低铁胁迫的作用, 利用农杆菌介导法将大豆铁蛋白基因SoyFer1和内源反义铁蛋白基因 NtFer2的cDNA分别导入烟草基因组, 采集转基因烟草种子.对T1转基因烟草的卡那霉素抗性分析表明, 整合到烟草基因组的外源基因多为单拷贝基因, 也有少数为多拷贝基因.对具有卡那霉素抗性的转基因植株进行PCR检测和Northern杂交分析表明, 外源基因已整合到烟草基因组中, 并且得到了正确表达.将转基因株系移栽到铁离子浓度不同的培养基中生长2个月后进行比较表明, 转大豆铁蛋白基因烟草株系的生长量明显高于非转基因烟草株系, 而转内源反义铁蛋白基因烟草株系的生长量则明显低于非转基因烟草株系.转大豆铁蛋白基因和转内源反义铁蛋白基因烟草株系的叶绿素含量、丙二醛(MDA)含量和过氧化物酶(POD)活性等生理性状也发生了明显变化, 表现为转大豆铁蛋白基因株系的叶绿素含量明显增加, POD活性明显增强, MDA含量明显降低; 而转内源反义铁蛋白基因株系的叶绿素含量、POD活性和MDA含量等则表现为与转大豆铁蛋白基因株系的相反.铁蛋白过量表达提高了烟草耐低铁能力, 而铁蛋白抑制表达则降低了烟草耐低铁能力.
鐵是植物生長髮育的必需元素.由于土壤中的三價鐵離子不能被植物直接利用, 使一些植物經常錶現齣缺鐵癥狀.為探討利用鐵蛋白基因提高植物耐低鐵脅迫的作用, 利用農桿菌介導法將大豆鐵蛋白基因SoyFer1和內源反義鐵蛋白基因 NtFer2的cDNA分彆導入煙草基因組, 採集轉基因煙草種子.對T1轉基因煙草的卡那黴素抗性分析錶明, 整閤到煙草基因組的外源基因多為單拷貝基因, 也有少數為多拷貝基因.對具有卡那黴素抗性的轉基因植株進行PCR檢測和Northern雜交分析錶明, 外源基因已整閤到煙草基因組中, 併且得到瞭正確錶達.將轉基因株繫移栽到鐵離子濃度不同的培養基中生長2箇月後進行比較錶明, 轉大豆鐵蛋白基因煙草株繫的生長量明顯高于非轉基因煙草株繫, 而轉內源反義鐵蛋白基因煙草株繫的生長量則明顯低于非轉基因煙草株繫.轉大豆鐵蛋白基因和轉內源反義鐵蛋白基因煙草株繫的葉綠素含量、丙二醛(MDA)含量和過氧化物酶(POD)活性等生理性狀也髮生瞭明顯變化, 錶現為轉大豆鐵蛋白基因株繫的葉綠素含量明顯增加, POD活性明顯增彊, MDA含量明顯降低; 而轉內源反義鐵蛋白基因株繫的葉綠素含量、POD活性和MDA含量等則錶現為與轉大豆鐵蛋白基因株繫的相反.鐵蛋白過量錶達提高瞭煙草耐低鐵能力, 而鐵蛋白抑製錶達則降低瞭煙草耐低鐵能力.
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