中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2008年
5期
321-324,封二
,共5页
孙淑娜%桂永浩%钱林溪%王跃祥%蒋璆%宋后燕
孫淑娜%桂永浩%錢林溪%王躍祥%蔣璆%宋後燕
손숙나%계영호%전림계%왕약상%장구%송후연
叶酸%二氢叶酸还原酶%斑马鱼%背主动脉%细胞凋亡
葉痠%二氫葉痠還原酶%斑馬魚%揹主動脈%細胞凋亡
협산%이경협산환원매%반마어%배주동맥%세포조망
目的 观察叶酸缺乏斑马鱼胚胎的背主动脉(DA)发育情况,初步探讨叶酸缺乏后胚胎DA发育异常的机理.方法 采用将二氢叶酸还原酶(DHFR)功能阻断的方法构建叶酸缺乏斑马鱼模型,分别应用DHFR抑制剂甲氨蝶呤(MTX)以及DHFR基因knock-down技术处理斑马鱼胚胎.在胚胎发育至48 hpf时在显微镜下观察胚胎的整体发育情况,在60 hpf时应用荧光显微造影的方法观察胚胎的背主动脉发育状况.利用胚胎整体原位杂交和real-time PcR的方法检测影响DA发育的关键因子ephrinB2、Ang-1和Radar的表达情况,利用TUNEL法检测胚胎底索的凋亡情况.结果 MTX处理组胚胎以及DHFR knock-down组胚胎有相似的胚胎发育异常表型.荧光显微造影显示叶酸缺乏组胚胎的DA发育异常.叶酸缺乏组胚胎的ephrinB2、Ang-1和Radar表达减弱,底索凋亡增加.结论 叶酸缺乏可导致斑马鱼胚胎背主动脉发育异常,其机理与ephrinB2、Ang-1和Radar的表达减弱以及底索凋亡增加有关.
目的 觀察葉痠缺乏斑馬魚胚胎的揹主動脈(DA)髮育情況,初步探討葉痠缺乏後胚胎DA髮育異常的機理.方法 採用將二氫葉痠還原酶(DHFR)功能阻斷的方法構建葉痠缺乏斑馬魚模型,分彆應用DHFR抑製劑甲氨蝶呤(MTX)以及DHFR基因knock-down技術處理斑馬魚胚胎.在胚胎髮育至48 hpf時在顯微鏡下觀察胚胎的整體髮育情況,在60 hpf時應用熒光顯微造影的方法觀察胚胎的揹主動脈髮育狀況.利用胚胎整體原位雜交和real-time PcR的方法檢測影響DA髮育的關鍵因子ephrinB2、Ang-1和Radar的錶達情況,利用TUNEL法檢測胚胎底索的凋亡情況.結果 MTX處理組胚胎以及DHFR knock-down組胚胎有相似的胚胎髮育異常錶型.熒光顯微造影顯示葉痠缺乏組胚胎的DA髮育異常.葉痠缺乏組胚胎的ephrinB2、Ang-1和Radar錶達減弱,底索凋亡增加.結論 葉痠缺乏可導緻斑馬魚胚胎揹主動脈髮育異常,其機理與ephrinB2、Ang-1和Radar的錶達減弱以及底索凋亡增加有關.
목적 관찰협산결핍반마어배태적배주동맥(DA)발육정황,초보탐토협산결핍후배태DA발육이상적궤리.방법 채용장이경협산환원매(DHFR)공능조단적방법구건협산결핍반마어모형,분별응용DHFR억제제갑안접령(MTX)이급DHFR기인knock-down기술처리반마어배태.재배태발육지48 hpf시재현미경하관찰배태적정체발육정황,재60 hpf시응용형광현미조영적방법관찰배태적배주동맥발육상황.이용배태정체원위잡교화real-time PcR적방법검측영향DA발육적관건인자ephrinB2、Ang-1화Radar적표체정황,이용TUNEL법검측배태저색적조망정황.결과 MTX처리조배태이급DHFR knock-down조배태유상사적배태발육이상표형.형광현미조영현시협산결핍조배태적DA발육이상.협산결핍조배태적ephrinB2、Ang-1화Radar표체감약,저색조망증가.결론 협산결핍가도치반마어배태배주동맥발육이상,기궤리여ephrinB2、Ang-1화Radar적표체감약이급저색조망증가유관.
