中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2009年
1期
44-48
,共5页
徐公义%王海丽%葛长城%王长军%唐家琪
徐公義%王海麗%葛長城%王長軍%唐傢琪
서공의%왕해려%갈장성%왕장군%당가기
猪链球菌2型%胞外因子%表达%单克隆抗体
豬鏈毬菌2型%胞外因子%錶達%單剋隆抗體
저련구균2형%포외인자%표체%단극륭항체
目的 建立猪链球菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫学检测方法.方法 将SS2 四川人源分离株ZYH24 EF抗原性强的区域进行克隆、原核表达,对表达的融合蛋白(rEF-GST)采用亲和层析法纯化、经凝血酶作用去除标签蛋白获得纯化的EF目的 蛋白.以纯化的EF免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗EF单克隆抗体(McAAbs)进行譬异性分析,并建立猪链球菌EF检测方法.结果 得到rEF-GST和EF相对分子量分别为62 000和35 000;建立了4株稳定分泌抗EF McAbs的杂交瘤细胞系2G1、5H7、3H4和1F2;腹水的特异性鉴定结果表明4株McAbs能特异性的识别EF;以2G1单抗腹水和抗EF多克隆抗血清建立的夹心ELISA可特异地检测EF.结论 4株抗EF McAbs的制备对猪链球菌检测试剂盒的研制以及该病的防治有重要意义.
目的 建立豬鏈毬菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫學檢測方法.方法 將SS2 四川人源分離株ZYH24 EF抗原性彊的區域進行剋隆、原覈錶達,對錶達的融閤蛋白(rEF-GST)採用親和層析法純化、經凝血酶作用去除標籤蛋白穫得純化的EF目的 蛋白.以純化的EF免疫BALB/c小鼠,間接ELISA方法篩選暘性剋隆,對穫得的抗EF單剋隆抗體(McAAbs)進行譬異性分析,併建立豬鏈毬菌EF檢測方法.結果 得到rEF-GST和EF相對分子量分彆為62 000和35 000;建立瞭4株穩定分泌抗EF McAbs的雜交瘤細胞繫2G1、5H7、3H4和1F2;腹水的特異性鑒定結果錶明4株McAbs能特異性的識彆EF;以2G1單抗腹水和抗EF多剋隆抗血清建立的夾心ELISA可特異地檢測EF.結論 4株抗EF McAbs的製備對豬鏈毬菌檢測試劑盒的研製以及該病的防治有重要意義.
목적 건립저련구균2형(SS2)포외인자(EF)적면역학검측방법.방법 장SS2 사천인원분리주ZYH24 EF항원성강적구역진행극륭、원핵표체,대표체적융합단백(rEF-GST)채용친화층석법순화、경응혈매작용거제표첨단백획득순화적EF목적 단백.이순화적EF면역BALB/c소서,간접ELISA방법사선양성극륭,대획득적항EF단극륭항체(McAAbs)진행비이성분석,병건립저련구균EF검측방법.결과 득도rEF-GST화EF상대분자량분별위62 000화35 000;건립료4주은정분비항EF McAbs적잡교류세포계2G1、5H7、3H4화1F2;복수적특이성감정결과표명4주McAbs능특이성적식별EF;이2G1단항복수화항EF다극륭항혈청건립적협심ELISA가특이지검측EF.결론 4주항EF McAbs적제비대저련구균검측시제합적연제이급해병적방치유중요의의.
