CAJ | 학술논문

目的:探讨外源性p53AIP1(p53-regulated apoptosis-inducing protein 1)基因抗肿瘤效应及其作用机制,以评估p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性.方法:构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1,感染人肝癌细胞HepG2,应用MTT比色法、Western blotting、流式细胞术、罗丹明染色以及电镜等观察外源性p53AIP1基因表达对肿瘤细胞的作用及其相关机制.小鼠皮下接种感染Ad-p53AIP1的小鼠乳腺癌4T1细胞,观察Ad-p53AIP1对肿瘤细胞体内成瘤性的影响;建立4T1细胞皮下移植瘤小鼠模型, 直接瘤内多点注射重组腺病毒,观察Ad-p53AIP1的抗肿瘤疗效.结果:感染Ad-p53AIP1的HepG2细胞能够高效表达P53AIP1蛋白.MTT检测显示Ad-p53AIP1对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率达50%以上;流式细胞术分析证实p53AIP1使肿瘤细胞周期阻滞于G2/M期;罗丹明染色、电镜观察以及凋亡相关蛋白PARP表达的检测均证实p53AIP1能诱导肿瘤细胞发生明显凋亡.感染Ad-p53AIP1的肿瘤细胞体内成瘤受到非常明显的抑制(P<0.01), Ad-p53AIP1瘤体注射对移植瘤生长也有明显的抑制作用(P<0.05).Western blotting以及RT-PCR检测证实Ad-p53AIP1对p53 mRNA表达无影响,能下调mdm2基因的表达;p53AIP1能上调P53蛋白的表达、下调MDM2蛋白的表达水平,同时还影响P21等细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达.结论:p53AIP1有明显的体内外抗肿瘤作用,其作用机制与其反向调控P53蛋白、调控多种细胞周期和细胞凋亡相关蛋白、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关,该基因在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用前景.
목적:탐토외원성p53AIP1(p53-regulated apoptosis-inducing protein 1)기인항종류효응급기작용궤제,이평고p53AIP1기인재종류기인치료중응용적가행성.방법:구건휴대p53AIP1기인적중조복제결함형선병독Ad-p53AIP1,감염인간암세포HepG2,응용MTT비색법、Western blotting、류식세포술、라단명염색이급전경등관찰외원성p53AIP1기인표체대종류세포적작용급기상관궤제.소서피하접충감염Ad-p53AIP1적소서유선암4T1세포,관찰Ad-p53AIP1대종류세포체내성류성적영향;건립4T1세포피하이식류소서모형, 직접류내다점주사중조선병독,관찰Ad-p53AIP1적항종류료효.결과:감염Ad-p53AIP1적HepG2세포능구고효표체P53AIP1단백.MTT검측현시Ad-p53AIP1대인간암세포HepG2적생장억제솔체50%이상;류식세포술분석증실p53AIP1사종류세포주기조체우G2/M기;라단명염색、전경관찰이급조망상관단백PARP표체적검측균증실p53AIP1능유도종류세포발생명현조망.감염Ad-p53AIP1적종류세포체내성류수도비상명현적억제(P<0.01), Ad-p53AIP1류체주사대이식류생장야유명현적억제작용(P<0.05).Western blotting이급RT-PCR검측증실Ad-p53AIP1대p53 mRNA표체무영향,능하조mdm2기인적표체;p53AIP1능상조P53단백적표체、하조MDM2단백적표체수평,동시환영향P21등세포주기상관단백화조망상관단백적표체.결론:p53AIP1유명현적체내외항종류작용,기작용궤제여기반향조공P53단백、조공다충세포주기화세포조망상관단백、유도세포주기조체화세포조망유관,해기인재종류기인치료중구유잠재적응용전경.