江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
2期
320-324
,共5页
冯志新%迟灵芝%刘茂军%王海燕%甘源%吴叙苏%邵国青
馮誌新%遲靈芝%劉茂軍%王海燕%甘源%吳敘囌%邵國青
풍지신%지령지%류무군%왕해연%감원%오서소%소국청
猪肺炎支原体%P46蛋白%单克隆抗体
豬肺炎支原體%P46蛋白%單剋隆抗體
저폐염지원체%P46단백%단극륭항체
P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白.制备针对该蛋白的特异性单抗能为猪肺炎支原体的检测及机理研究提供有效的资源.本研究取猪肺炎支原体全菌抗原免疫小鼠,用大肠杆菌表达的P46蛋白作为筛选抗原制备了2株特异性单克隆抗体1A4和3C11.结果显示,2株单抗ELISA效价最高可达1:64 000.Western-blot结果表明,2株单抗均能与原核表达的P46蛋白及猪肺炎支原体全菌蛋白中46 000大小的蛋白发生特异性反应;2株杂交瘤细胞株经3个月冻存或连续传代3个月均能保持较高的滴度.本研究成功制备了2株针对猪肺炎支原体P46蛋白的特异、稳定且高滴度的单克隆抗体.
P46蛋白是豬肺炎支原體的主要免疫優勢蛋白,且與其他支原體無交扠反應,常作為豬肺炎支原體檢測的靶蛋白.製備針對該蛋白的特異性單抗能為豬肺炎支原體的檢測及機理研究提供有效的資源.本研究取豬肺炎支原體全菌抗原免疫小鼠,用大腸桿菌錶達的P46蛋白作為篩選抗原製備瞭2株特異性單剋隆抗體1A4和3C11.結果顯示,2株單抗ELISA效價最高可達1:64 000.Western-blot結果錶明,2株單抗均能與原覈錶達的P46蛋白及豬肺炎支原體全菌蛋白中46 000大小的蛋白髮生特異性反應;2株雜交瘤細胞株經3箇月凍存或連續傳代3箇月均能保持較高的滴度.本研究成功製備瞭2株針對豬肺炎支原體P46蛋白的特異、穩定且高滴度的單剋隆抗體.
P46단백시저폐염지원체적주요면역우세단백,차여기타지원체무교차반응,상작위저폐염지원체검측적파단백.제비침대해단백적특이성단항능위저폐염지원체적검측급궤리연구제공유효적자원.본연구취저폐염지원체전균항원면역소서,용대장간균표체적P46단백작위사선항원제비료2주특이성단극륭항체1A4화3C11.결과현시,2주단항ELISA효개최고가체1:64 000.Western-blot결과표명,2주단항균능여원핵표체적P46단백급저폐염지원체전균단백중46 000대소적단백발생특이성반응;2주잡교류세포주경3개월동존혹련속전대3개월균능보지교고적적도.본연구성공제비료2주침대저폐염지원체P46단백적특이、은정차고적도적단극륭항체.
