解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2010年
6期
885-890
,共6页
滕伟%郭志坤%李琼%孙庆宁%王庆志%郁小兵
滕偉%郭誌坤%李瓊%孫慶寧%王慶誌%鬱小兵
등위%곽지곤%리경%손경저%왕경지%욱소병
Atelocollagen胶原支架%肌球蛋白%心肌细胞%三维培养%免疫组织化学%免疫荧光%乳大鼠
Atelocollagen膠原支架%肌毬蛋白%心肌細胞%三維培養%免疫組織化學%免疫熒光%乳大鼠
Atelocollagen효원지가%기구단백%심기세포%삼유배양%면역조직화학%면역형광%유대서
目的 在Atelocollagen胶原支架上三维培养具有收缩功能的乳鼠心肌细胞块,为进一步开展心肌组织工程奠定基础.方法 乳鼠心肌消化培养、纯化后,种植到Atelocollagen胶原支架上进行三维培养.应用倒置显微镜动态观察心肌细胞在Atelocollagen胶原支架上的生长情况.对三维培养不同时间的心肌细胞块进行石蜡包埋、切片,分别进行HE染色、肌球蛋白免疫组织化学染色、肌球蛋白免疫荧光染色、透射电镜观察,对三维培养的细胞进行全面鉴定.结果 心肌细胞种植到Atelocollagen胶原支架上6h开始贴支架生长,培养2d心肌细胞相互融合,并与Atelocollagen胶原支架形成复合体,连同支架一起搏动.培养6d细胞与细胞间结合较前更紧密.培养10d细胞在Atelocollagen胶原支架孔中交织成网状,18～20d细胞充满大部分支架网孔,进一步形成紧密的心肌细胞块.在整个培养过程中,心肌细胞始终保持良好的自律性收缩.形态学鉴定证明,支架网孔中生长的主要是心肌细胞,极少数为纤维样细胞.结论 利用Atelocollagen胶原支架能够培养出较为理想的、具有收缩功能的三维心肌细胞块.
目的 在Atelocollagen膠原支架上三維培養具有收縮功能的乳鼠心肌細胞塊,為進一步開展心肌組織工程奠定基礎.方法 乳鼠心肌消化培養、純化後,種植到Atelocollagen膠原支架上進行三維培養.應用倒置顯微鏡動態觀察心肌細胞在Atelocollagen膠原支架上的生長情況.對三維培養不同時間的心肌細胞塊進行石蠟包埋、切片,分彆進行HE染色、肌毬蛋白免疫組織化學染色、肌毬蛋白免疫熒光染色、透射電鏡觀察,對三維培養的細胞進行全麵鑒定.結果 心肌細胞種植到Atelocollagen膠原支架上6h開始貼支架生長,培養2d心肌細胞相互融閤,併與Atelocollagen膠原支架形成複閤體,連同支架一起搏動.培養6d細胞與細胞間結閤較前更緊密.培養10d細胞在Atelocollagen膠原支架孔中交織成網狀,18～20d細胞充滿大部分支架網孔,進一步形成緊密的心肌細胞塊.在整箇培養過程中,心肌細胞始終保持良好的自律性收縮.形態學鑒定證明,支架網孔中生長的主要是心肌細胞,極少數為纖維樣細胞.結論 利用Atelocollagen膠原支架能夠培養齣較為理想的、具有收縮功能的三維心肌細胞塊.
목적 재Atelocollagen효원지가상삼유배양구유수축공능적유서심기세포괴,위진일보개전심기조직공정전정기출.방법 유서심기소화배양、순화후,충식도Atelocollagen효원지가상진행삼유배양.응용도치현미경동태관찰심기세포재Atelocollagen효원지가상적생장정황.대삼유배양불동시간적심기세포괴진행석사포매、절편,분별진행HE염색、기구단백면역조직화학염색、기구단백면역형광염색、투사전경관찰,대삼유배양적세포진행전면감정.결과 심기세포충식도Atelocollagen효원지가상6h개시첩지가생장,배양2d심기세포상호융합,병여Atelocollagen효원지가형성복합체,련동지가일기박동.배양6d세포여세포간결합교전경긴밀.배양10d세포재Atelocollagen효원지가공중교직성망상,18～20d세포충만대부분지가망공,진일보형성긴밀적심기세포괴.재정개배양과정중,심기세포시종보지량호적자률성수축.형태학감정증명,지가망공중생장적주요시심기세포,겁소수위섬유양세포.결론 이용Atelocollagen효원지가능구배양출교위이상적、구유수축공능적삼유심기세포괴.
