视黄酸核受体γ重组腺病毒构建及其鉴定
시황산핵수체γ중조선병독구건급기감정
Construction and Identification of Recombinant Adenoviral Vector Carrying Rat Retinoic Acid Receptor γ Gene
  • 万方数据
    医学分子生物学杂志 의학분자생물학잡지
    FOREIGN MEDICAL SCIENCES
    2011年 4期 283-288 ,共6页

    龚敏%毕杨%张赟%江伟%陈洁%魏小平%刘友学%李廷玉

    공민%필양%장빈%강위%진길%위소평%류우학%리정옥

    视黄酸核受体γ%重组腺病毒%视黄酸信号转导通路%骨髓间充质干细胞 視黃痠覈受體γ%重組腺病毒%視黃痠信號轉導通路%骨髓間充質榦細胞
    시황산핵수체γ%중조선병독%시황산신호전도통로%골수간충질간세포
    目的 构建携带大鼠视黄酸核受体γ(retinoic acid receptor γ,RARγ)的重组腺病毒,为研究RARγ在骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的作用奠定基础.方法 体外扩增大鼠RARγ基因,将其定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrace-TOX构建重组质粒pAdTrace-RARγ,并在BJ5183菌中与骨架质粒pAdEasy-1重组获得腺病毒载体pAd-RARγ,PacⅠ酶切后转染HEK 293细胞包装腺病毒.腺病毒Ad-RARγ感染大鼠MSCs,Real-time PCR和Western印迹检测 RARγ的表达.结果 PCR,酶切及测序均证实RARγ正确克隆至腺病毒质粒载体中,Ad-RARγ对MSCs感染率达60 %~70 %,并明显增强RARγ基因和蛋白的表达.结论 成功构建携带RARγ的重组腺病毒,并具有上调大鼠MSCs RARγ基因和蛋白表达的功能.
    목적 구건휴대대서시황산핵수체γ(retinoic acid receptor γ,RARγ)적중조선병독,위연구RARγ재골수간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)성신경분화중적작용전정기출.방법 체외확증대서RARγ기인,장기정향극륭지선병독천사질립pAdTrace-TOX구건중조질립pAdTrace-RARγ,병재BJ5183균중여골가질립pAdEasy-1중조획득선병독재체pAd-RARγ,PacⅠ매절후전염HEK 293세포포장선병독.선병독Ad-RARγ감염대서MSCs,Real-time PCR화Western인적검측 RARγ적표체.결과 PCR,매절급측서균증실RARγ정학극륭지선병독질립재체중,Ad-RARγ대MSCs감염솔체60 %~70 %,병명현증강RARγ기인화단백적표체.결론 성공구건휴대RARγ적중조선병독,병구유상조대서MSCs RARγ기인화단백표체적공능.
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