西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
1期
23-28
,共6页
梁丽建%江玉梅%夏冰%蒋明敏%彭峰%何树兰%汪仁
樑麗建%江玉梅%夏冰%蔣明敏%彭峰%何樹蘭%汪仁
량려건%강옥매%하빙%장명민%팽봉%하수란%왕인
石蒜%儿茶酚氧位甲基转移酶基因%加兰他敏%原核表达
石蒜%兒茶酚氧位甲基轉移酶基因%加蘭他敏%原覈錶達
석산%인다분양위갑기전이매기인%가란타민%원핵표체
采用同源克隆与RACE相结合的方法,首次从石蒜叶片中克隆到可能与加兰他敏生物合成相关的儿茶酚氧位甲基转移酶基因,命名为LrCOMT.核酸序列分析显示,该cDNA全长1 246 bp,开放阅读框1 101 bp,编码366氨基酸.氨基酸序列分析与比对发现,LrCOMT编码的氨基酸序列具有COMT蛋白的特征区域,且与鸢尾、玉米、烟草等植物COMT的同源性大于60％.将LrCOMT基因连接到原核表达载体pET-29a上,转化大肠杆菌BL21(DE3)的原核表达结果显示,重组蛋白受IPTG诱导表达,分子量大小约为40 kD,与已报道的其他植物COMT大小基本一致.
採用同源剋隆與RACE相結閤的方法,首次從石蒜葉片中剋隆到可能與加蘭他敏生物閤成相關的兒茶酚氧位甲基轉移酶基因,命名為LrCOMT.覈痠序列分析顯示,該cDNA全長1 246 bp,開放閱讀框1 101 bp,編碼366氨基痠.氨基痠序列分析與比對髮現,LrCOMT編碼的氨基痠序列具有COMT蛋白的特徵區域,且與鳶尾、玉米、煙草等植物COMT的同源性大于60％.將LrCOMT基因連接到原覈錶達載體pET-29a上,轉化大腸桿菌BL21(DE3)的原覈錶達結果顯示,重組蛋白受IPTG誘導錶達,分子量大小約為40 kD,與已報道的其他植物COMT大小基本一緻.
채용동원극륭여RACE상결합적방법,수차종석산협편중극륭도가능여가란타민생물합성상관적인다분양위갑기전이매기인,명명위LrCOMT.핵산서렬분석현시,해cDNA전장1 246 bp,개방열독광1 101 bp,편마366안기산.안기산서렬분석여비대발현,LrCOMT편마적안기산서렬구유COMT단백적특정구역,차여연미、옥미、연초등식물COMT적동원성대우60％.장LrCOMT기인련접도원핵표체재체pET-29a상,전화대장간균BL21(DE3)적원핵표체결과현시,중조단백수IPTG유도표체,분자량대소약위40 kD,여이보도적기타식물COMT대소기본일치.
