中国地方病学杂志
中國地方病學雜誌
중국지방병학잡지
CHINESE JOURNAL OF ENDEMIOLOGY
2005年
2期
161-163
,共3页
李小光%张凤民%马培林%陈小贝%杨爱英
李小光%張鳳民%馬培林%陳小貝%楊愛英
리소광%장봉민%마배림%진소패%양애영
柯萨奇病毒B组%cDNA末端快速扩增%序列分析
柯薩奇病毒B組%cDNA末耑快速擴增%序列分析
가살기병독B조%cDNA말단쾌속확증%서렬분석
目的探讨3′RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术检测柯萨奇B组病毒(CVB)的可行性,并建立相应的实验检测方法.方法首先自行设计柯萨奇B组病毒6个型别病毒基因组的一条通用引物spl;然后从柯萨奇病毒(CVB1～CVB6)感染的Hela细胞,提取总RNA,用引物sp1结合Oligo dT进行3′RACE扩增,将产物克隆到pGEM-T载体上,挑取阳性菌落进行序列测定,与标准株进行同源性比对.结果获得了柯萨奇B组病毒6个型别的3′末端扩增产物及其核苷酸序列,同源性分析的结果显示扩增毒株与标准株之间的核苷酸同源性在95%～99%之间,氨基酸同源性在98%～100%之间.结论设计的引物"sp1"是柯萨奇B组病毒6个型别病毒基因组的一条通用引物;该引物结合Oligo dT进行的3′RACE扩增可用于柯萨奇B组病毒的检测.
目的探討3′RACE(rapid amplification of cDNA ends)技術檢測柯薩奇B組病毒(CVB)的可行性,併建立相應的實驗檢測方法.方法首先自行設計柯薩奇B組病毒6箇型彆病毒基因組的一條通用引物spl;然後從柯薩奇病毒(CVB1～CVB6)感染的Hela細胞,提取總RNA,用引物sp1結閤Oligo dT進行3′RACE擴增,將產物剋隆到pGEM-T載體上,挑取暘性菌落進行序列測定,與標準株進行同源性比對.結果穫得瞭柯薩奇B組病毒6箇型彆的3′末耑擴增產物及其覈苷痠序列,同源性分析的結果顯示擴增毒株與標準株之間的覈苷痠同源性在95%～99%之間,氨基痠同源性在98%～100%之間.結論設計的引物"sp1"是柯薩奇B組病毒6箇型彆病毒基因組的一條通用引物;該引物結閤Oligo dT進行的3′RACE擴增可用于柯薩奇B組病毒的檢測.
목적탐토3′RACE(rapid amplification of cDNA ends)기술검측가살기B조병독(CVB)적가행성,병건립상응적실험검측방법.방법수선자행설계가살기B조병독6개형별병독기인조적일조통용인물spl;연후종가살기병독(CVB1～CVB6)감염적Hela세포,제취총RNA,용인물sp1결합Oligo dT진행3′RACE확증,장산물극륭도pGEM-T재체상,도취양성균락진행서렬측정,여표준주진행동원성비대.결과획득료가살기B조병독6개형별적3′말단확증산물급기핵감산서렬,동원성분석적결과현시확증독주여표준주지간적핵감산동원성재95%～99%지간,안기산동원성재98%～100%지간.결론설계적인물"sp1"시가살기B조병독6개형별병독기인조적일조통용인물;해인물결합Oligo dT진행적3′RACE확증가용우가살기B조병독적검측.
