中华血液学杂志
中華血液學雜誌
중화혈액학잡지
Chinese Journal of Hematology
2008年
1期
34-38
,共5页
陈新敏%冯文莉%许颂霄%曾建明%赵世巧%罗红伟%白卫君%王小中%黄宗干
陳新敏%馮文莉%許頌霄%曾建明%趙世巧%囉紅偉%白衛君%王小中%黃宗榦
진신민%풍문리%허송소%증건명%조세교%라홍위%백위군%왕소중%황종간
白血病%诱骗RNA%细胞分化%RNA结合蛋白E2
白血病%誘騙RNA%細胞分化%RNA結閤蛋白E2
백혈병%유편RNA%세포분화%RNA결합단백E2
目的 应用诱骗RNA(decoy RNA)靶向阻断RNA结合蛋白E2(hnRNP E2)调节CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPα)基因异常翻译的作用,诱导白血病细胞株K562细胞向粒系分化,并初步探讨其分子机制.方法 将已构建的hnRNP E2 decoy RNA表达质粒经阳离子脂质体的介导转染K562细胞,用G418筛选出稳定表达细胞株,用RT-PCR和Western blot方法检测该细胞株C/EBPα和粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)的表达,通过瑞特-姬姆萨染色观察细胞形态,免疫细胞化学法分析细胞粒系分化抗原CD13、CD15的表达.结果 筛选到稳定表达细胞株pG细胞,与未转染的K562细胞相比,其C/EBPα mRNA水平无改变,但相对分子质量42×103的C/EBPα蛋白(42kD-C/EBPα)水平升高了(49.7±5.5)%(P＜0.05);G-CSFR mRNA水平升高了(42.1±3.6)%(P＜0.05),其蛋白水半也.升高了(37.4±6.2)%(P＜0.05);细胞形态学方面观察到pG细胞出现中、晚幼粒细胞甚至成熟粒细胞的特征,且免疫细胞化学法检测显示粒系分化抗原CD13、CD15表达增高[阳性细胞百分比分别为(18.7±2.5)%和(15.2±2.6)%].结论 hnRNP E2 decoy RNA能够诱导K562细胞向粒系分化,G-CSF对其分化过程有促进作用,其作用机制可能与decoy RNA靶向阻断hnRNP E2,调节C/EBPαmRNA翻译,恢复42kD-C/EBPα表达,上调42kD-C/EBPα下游分化基因G-CSFR的表达有关.
目的 應用誘騙RNA(decoy RNA)靶嚮阻斷RNA結閤蛋白E2(hnRNP E2)調節CCAAT增彊子結閤蛋白(C/EBPα)基因異常翻譯的作用,誘導白血病細胞株K562細胞嚮粒繫分化,併初步探討其分子機製.方法 將已構建的hnRNP E2 decoy RNA錶達質粒經暘離子脂質體的介導轉染K562細胞,用G418篩選齣穩定錶達細胞株,用RT-PCR和Western blot方法檢測該細胞株C/EBPα和粒細胞集落刺激因子受體(G-CSFR)的錶達,通過瑞特-姬姆薩染色觀察細胞形態,免疫細胞化學法分析細胞粒繫分化抗原CD13、CD15的錶達.結果 篩選到穩定錶達細胞株pG細胞,與未轉染的K562細胞相比,其C/EBPα mRNA水平無改變,但相對分子質量42×103的C/EBPα蛋白(42kD-C/EBPα)水平升高瞭(49.7±5.5)%(P＜0.05);G-CSFR mRNA水平升高瞭(42.1±3.6)%(P＜0.05),其蛋白水半也.升高瞭(37.4±6.2)%(P＜0.05);細胞形態學方麵觀察到pG細胞齣現中、晚幼粒細胞甚至成熟粒細胞的特徵,且免疫細胞化學法檢測顯示粒繫分化抗原CD13、CD15錶達增高[暘性細胞百分比分彆為(18.7±2.5)%和(15.2±2.6)%].結論 hnRNP E2 decoy RNA能夠誘導K562細胞嚮粒繫分化,G-CSF對其分化過程有促進作用,其作用機製可能與decoy RNA靶嚮阻斷hnRNP E2,調節C/EBPαmRNA翻譯,恢複42kD-C/EBPα錶達,上調42kD-C/EBPα下遊分化基因G-CSFR的錶達有關.
목적 응용유편RNA(decoy RNA)파향조단RNA결합단백E2(hnRNP E2)조절CCAAT증강자결합단백(C/EBPα)기인이상번역적작용,유도백혈병세포주K562세포향립계분화,병초보탐토기분자궤제.방법 장이구건적hnRNP E2 decoy RNA표체질립경양리자지질체적개도전염K562세포,용G418사선출은정표체세포주,용RT-PCR화Western blot방법검측해세포주C/EBPα화립세포집락자격인자수체(G-CSFR)적표체,통과서특-희모살염색관찰세포형태,면역세포화학법분석세포립계분화항원CD13、CD15적표체.결과 사선도은정표체세포주pG세포,여미전염적K562세포상비,기C/EBPα mRNA수평무개변,단상대분자질량42×103적C/EBPα단백(42kD-C/EBPα)수평승고료(49.7±5.5)%(P＜0.05);G-CSFR mRNA수평승고료(42.1±3.6)%(P＜0.05),기단백수반야.승고료(37.4±6.2)%(P＜0.05);세포형태학방면관찰도pG세포출현중、만유립세포심지성숙립세포적특정,차면역세포화학법검측현시립계분화항원CD13、CD15표체증고[양성세포백분비분별위(18.7±2.5)%화(15.2±2.6)%].결론 hnRNP E2 decoy RNA능구유도K562세포향립계분화,G-CSF대기분화과정유촉진작용,기작용궤제가능여decoy RNA파향조단hnRNP E2,조절C/EBPαmRNA번역,회복42kD-C/EBPα표체,상조42kD-C/EBPα하유분화기인G-CSFR적표체유관.
