CAJ | 학술논문

目的研究卵清蛋白诱导的变应性哮喘(简称哮喘)模型鼠脾脏巨噬细胞Toll样受体(TLR)中TLR2和TLR4 mRNA的表达与该组织内辅助性T淋巴细胞(CD4+T)分泌的细胞因子的相互关系.方法用实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测TLR2和TLR4 mRNA与次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶管家基因(hypoxanthine-phosphoribosyl-transferase gene,HPRT)cDNA的荧光域值循环数(Ct),分别记为Ct2、Ct4和CtH,计算Ct2、Ct4与CtH的比值(Ct2/CtH、Ct4/CtH)为标本的TLR2和TLR4在mRNA水平上的相对表达量.进一步采用双标记流式细胞分析技术检测鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,随后将单克隆抗体和高尔基体转运阻断剂结合,检测CD4+T淋巴细胞胞内γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的变化.结果对照组与哮喘组小鼠Ct2/CtH差异有统计学意义(分别为1.26±0.0404,1.35±0.11,P＜0.01),哮喘组TLR2 mRNA表达下调;对照组与哮喘组小鼠Ct4/CtH差异无统计学意义(分别为0.98±0.06,1.01±0.04,P＞0.05);对照组与哮喘组小鼠IFN-γ和IL-4的变化差异有统计学意义[IFN-γ分别为(20.83±1.32)%,(31.78±2.54)%;IL-4分别为(2.04±0.24)%,(5.91±0.83)%,P＜0.05和P＜0.01],哮喘组脾脏CD4+T淋巴细胞IFN-γ和IL-4分泌增加.对照组与哮喘组小鼠IFN-γ/IL-4的比值差异有统计学意义(分别为10.30±1.05,3.58±0.39,P＜0.05).结论变应性哮喘模型鼠脾脏巨噬细胞TLR4 mRNA的表达无变化,但TLR2 mRNA的表达下调;在哮喘模型鼠脾脏CD4+T淋巴细胞中IFN-γ/IL-4比值降低.TLR2 mRNA表达的下调与IFN-γ和IL-4分泌的变化存在相关性,其机理有待进一步深入研究.
목적 연구란청단백유도적변응성효천(간칭효천)모형서비장거서세포Toll양수체(TLR)중TLR2화TLR4 mRNA적표체여해조직내보조성T림파세포(CD4+T)분비적세포인자적상호관계.방법용실시형광취합매련반응(FQ-PCR)검측TLR2화TLR4 mRNA여차황표령린산핵당기전이매관가기인(hypoxanthine-phosphoribosyl-transferase gene,HPRT)cDNA적형광역치순배수(Ct),분별기위Ct2、Ct4화CtH,계산Ct2、Ct4여CtH적비치(Ct2/CtH、Ct4/CtH)위표본적TLR2화TLR4재mRNA수평상적상대표체량.진일보채용쌍표기류식세포분석기술검측서비장CD4+T림파세포,수후장단극륭항체화고이기체전운조단제결합,검측CD4+T림파세포포내γ-간우소(IFN-γ)화백세포개소-4(IL-4)적변화.결과대조조여효천조소서Ct2/CtH차이유통계학의의(분별위1.26±0.0404,1.35±0.11,P＜0.01),효천조TLR2 mRNA표체하조;대조조여효천조소서Ct4/CtH차이무통계학의의(분별위0.98±0.06,1.01±0.04,P＞0.05);대조조여효천조소서IFN-γ화IL-4적변화차이유통계학의의[IFN-γ분별위(20.83±1.32)%,(31.78±2.54)%;IL-4분별위(2.04±0.24)%,(5.91±0.83)%,P＜0.05화P＜0.01],효천조비장CD4+T림파세포IFN-γ화IL-4분비증가.대조조여효천조소서IFN-γ/IL-4적비치차이유통계학의의(분별위10.30±1.05,3.58±0.39,P＜0.05).결론 변응성효천모형서비장거서세포TLR4 mRNA적표체무변화,단TLR2 mRNA적표체하조;재효천모형서비장CD4+T림파세포중IFN-γ/IL-4비치강저.TLR2 mRNA표체적하조여IFN-γ화IL-4분비적변화존재상관성,기궤리유대진일보심입연구.