CAJ | 학술논문

目的为了建立一种新的非同位素的核酸杂交的测定方法-酶放大时间分辨荧光分析法(EATRFA)或酶放大镧系元素发光分析法(EALL),使核酸杂交分析能更广泛地应用于临床诊断.方法将生物素-链霉亲和素的高亲和力和放大作用、酶放大作用、镧系元素螯合物的固有优点和时间分辨测量技术结合起来.通过碱性磷酸酶把5-氟水杨酸磷酸酯转变为5-氟水杨酸(5-FSA),5-FSA与Tb3+和EDTA形成发荧光的三元复合物.结果对靶pBR322DNA测定的标准曲线范围宽,可达三个数量级;灵敏度为10pg;准确度为90%～115%.研究和优化了紫外灯照射时间,生物素化探针、AP-SA、5-FSAP和Tb-EDTA等的浓度以及洗涤方法等主要影响因素.发现了新的荧光稳定技术.结论核酸杂交的EATRFA或EALL是一种灵敏的无需转移的简单的全新分析方法,有很好的应用前景.
목적위료건립일충신적비동위소적핵산잡교적측정방법-매방대시간분변형광분석법(EATRFA)혹매방대란계원소발광분석법(EALL),사핵산잡교분석능경엄범지응용우림상진단.방법장생물소-련매친화소적고친화력화방대작용、매방대작용、란계원소오합물적고유우점화시간분변측량기술결합기래.통과감성린산매파5-불수양산린산지전변위5-불수양산(5-FSA),5-FSA여Tb3+화EDTA형성발형광적삼원복합물.결과대파pBR322DNA측정적표준곡선범위관,가체삼개수량급;령민도위10pg;준학도위90%～115%.연구화우화료자외등조사시간,생물소화탐침、AP-SA、5-FSAP화Tb-EDTA등적농도이급세조방법등주요영향인소.발현료신적형광은정기술.결론핵산잡교적EATRFA혹EALL시일충령민적무수전이적간단적전신분석방법,유흔호적응용전경.