航天医学与医学工程
航天醫學與醫學工程
항천의학여의학공정
SPACE MEDICINE & MEDICAL ENGINEERING
2006年
4期
249-252
,共4页
汪宇辉%胡丽娟%鲁芳%刘延友%江舟%冀治鸿%杨波%王正荣
汪宇輝%鬍麗娟%魯芳%劉延友%江舟%冀治鴻%楊波%王正榮
왕우휘%호려연%로방%류연우%강주%기치홍%양파%왕정영
时间生物学%生物节律%酵母双杂交%层粘连蛋白受体%Period1基因
時間生物學%生物節律%酵母雙雜交%層粘連蛋白受體%Period1基因
시간생물학%생물절률%효모쌍잡교%층점련단백수체%Period1기인
目的 寻找与节律蛋白hPeriod1(hPer1)相互作用的蛋白,并对筛选出的层粘连蛋白受体Ⅰ(Lamr1)在节律系统中的功能作初步研究. 方法 分别构建pGAD rec/脑cDNA文库和pGBKT7/hPer1bHLH-PAS重组诱饵蛋白质粒,酵母双杂交筛选下丘脑里与hPer1相互作用的蛋白.利用RT-PCR技术检测新蛋白在脑、肺、心、肝、肾组织中的表达及在SH-SY5Y细胞中的节律性质.通过RNA干扰技术研究新蛋白与hPer1的关系. 结果 通过酵母双杂交筛选,证明Lamr1能与hPer1蛋白发生相互作用.该蛋白在脑、肺、心、肝、肾组织广泛表达,灰度比较显示经马血清诱导后的SH-SY5Y细胞的hPer1表达呈现近日节律,而Lamr1表达无节律变化.RNA干扰显示hPer1表达下调不影响Lamr1的表达. 结论 Lamr1能与hPer1蛋白发生相互作用,但其表达在RNA水平无节律变化.Lamr1参与细胞的黏附、转移和侵袭.其前体蛋白作为核蛋白参与细胞蛋白的合成.Lamr1可能参与hPer1相关的生物节律系统的信号传出.
目的 尋找與節律蛋白hPeriod1(hPer1)相互作用的蛋白,併對篩選齣的層粘連蛋白受體Ⅰ(Lamr1)在節律繫統中的功能作初步研究. 方法 分彆構建pGAD rec/腦cDNA文庫和pGBKT7/hPer1bHLH-PAS重組誘餌蛋白質粒,酵母雙雜交篩選下丘腦裏與hPer1相互作用的蛋白.利用RT-PCR技術檢測新蛋白在腦、肺、心、肝、腎組織中的錶達及在SH-SY5Y細胞中的節律性質.通過RNA榦擾技術研究新蛋白與hPer1的關繫. 結果 通過酵母雙雜交篩選,證明Lamr1能與hPer1蛋白髮生相互作用.該蛋白在腦、肺、心、肝、腎組織廣汎錶達,灰度比較顯示經馬血清誘導後的SH-SY5Y細胞的hPer1錶達呈現近日節律,而Lamr1錶達無節律變化.RNA榦擾顯示hPer1錶達下調不影響Lamr1的錶達. 結論 Lamr1能與hPer1蛋白髮生相互作用,但其錶達在RNA水平無節律變化.Lamr1參與細胞的黏附、轉移和侵襲.其前體蛋白作為覈蛋白參與細胞蛋白的閤成.Lamr1可能參與hPer1相關的生物節律繫統的信號傳齣.
목적 심조여절률단백hPeriod1(hPer1)상호작용적단백,병대사선출적층점련단백수체Ⅰ(Lamr1)재절률계통중적공능작초보연구. 방법 분별구건pGAD rec/뇌cDNA문고화pGBKT7/hPer1bHLH-PAS중조유이단백질립,효모쌍잡교사선하구뇌리여hPer1상호작용적단백.이용RT-PCR기술검측신단백재뇌、폐、심、간、신조직중적표체급재SH-SY5Y세포중적절률성질.통과RNA간우기술연구신단백여hPer1적관계. 결과 통과효모쌍잡교사선,증명Lamr1능여hPer1단백발생상호작용.해단백재뇌、폐、심、간、신조직엄범표체,회도비교현시경마혈청유도후적SH-SY5Y세포적hPer1표체정현근일절률,이Lamr1표체무절률변화.RNA간우현시hPer1표체하조불영향Lamr1적표체. 결론 Lamr1능여hPer1단백발생상호작용,단기표체재RNA수평무절률변화.Lamr1삼여세포적점부、전이화침습.기전체단백작위핵단백삼여세포단백적합성.Lamr1가능삼여hPer1상관적생물절률계통적신호전출.
