CAJ | 학술논문

目的建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱,初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达,为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础.方法采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,银染显色,Image Master图象分析系统分析,从胶中选取分离蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索MSDP、SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质.结果获得重复性和分辨率较好的脊髓双向凝胶电泳图谱.质谱分析了12个蛋白质点,获取6张肽质量指纹图谱.通过查询数据库鉴定了9个蛋白质.通过对过表达脊髓损伤中蛋白质表达谱改变的研究,鉴定出9个差异表达蛋白质,这些蛋白质包括等.这些差异蛋白质涉及基因为上调蛋白钙蛋白酶Calpain、神经丝蛋白M Neurofilament tripet α1-糖蛋白α1-Acid-glycoprotein、Oxygen regulated protein 1在脊髓损伤组下调.钙蛋白酶抑制剂Calpain inhibitor,假象蛋白-10 Hypothetical protein cgi-10在脊髓损伤组消失.并在损伤组出现新蛋白预测蛋白Hypothetical 152.1 kDa protein和核内寡聚肽酶Endooligopeptidase A reated protein.结论成功构建脊髓损伤与正常脊髓双向凝胶电泳图谱.并应用质谱技术鉴定了特异蛋白质点.在我们所鉴定的脊髓损伤过程中发生最显著变化的蛋白质中,有7种蛋白具有与一致的变化趋势,其中钙蛋白酶、神经丝蛋白、神经营养素低亲合力受体(p75NTR)、α1-糖蛋白、氧调节蛋白1、钙蛋白酶抑制剂、假想蛋白-10表达上调、下调与消失变化在脊髓损伤中居极其重要地位.
목적건립급성척수손상쌍향응효전영도보,초보관찰급성척수손상조직중단백질조적변화여차이표체,위진일보탐토급성척수손상분자궤제전정료기출.방법채용쌍향응효전영분리척수총단백,은염현색,Image Master도상분석계통분석,종효중선취분리단백질점,기질보조격광해석전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)분석획취태질량지문도보(PMF),Mascot연건수색MSDP、SWISS-PROT수거고감정단백질.결과획득중복성화분변솔교호적척수쌍향응효전영도보.질보분석료12개단백질점,획취6장태질량지문도보.통과사순수거고감정료9개단백질.통과대과표체척수손상중단백질표체보개변적연구,감정출9개차이표체단백질,저사단백질포괄등.저사차이단백질섭급기인위상조단백개단백매Calpain、신경사단백M Neurofilament tripet α1-당단백α1-Acid-glycoprotein、Oxygen regulated protein 1재척수손상조하조.개단백매억제제Calpain inhibitor,가상단백-10 Hypothetical protein cgi-10재척수손상조소실.병재손상조출현신단백예측단백Hypothetical 152.1 kDa protein화핵내과취태매Endooligopeptidase A reated protein.결론성공구건척수손상여정상척수쌍향응효전영도보.병응용질보기술감정료특이단백질점.재아문소감정적척수손상과정중발생최현저변화적단백질중,유7충단백구유여일치적변화추세,기중개단백매、신경사단백、신경영양소저친합력수체(p75NTR)、α1-당단백、양조절단백1、개단백매억제제、가상단백-10표체상조、하조여소실변화재척수손상중거겁기중요지위.