生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
8期
104-143
,共40页
高德富%牛乐%孙春阳%张小莉
高德富%牛樂%孫春暘%張小莉
고덕부%우악%손춘양%장소리
核迁移蛋白C%B16%黑色素瘤细胞%毕赤酵母%MTT
覈遷移蛋白C%B16%黑色素瘤細胞%畢赤酵母%MTT
핵천이단백C%B16%흑색소류세포%필적효모%MTT
利用RT-PCR方法从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆了全长核迁移蛋白C(Nuclear distribution C,NUDC)基因,构建了该基因的毕赤酵母表达质粒pPICZaA-NUDC并在受体细胞Pichia pastoris GS115中获得表达,通过制备融合表达蛋白的多克隆抗体分析其对黑色素瘤细胞活性的影响.结果表明,克隆的NUDC基因全长1 000bp,含有完整的编码框,经SDS-PAGE和Western blotting分析表明,该基因相对分子质量约为45 kD.表达的蛋白能与兔抗NUDC抗体发生反应,制备的NUDC蛋白抗体可抑制黑色素瘤细胞生长.
利用RT-PCR方法從小鼠B16黑色素瘤細胞中剋隆瞭全長覈遷移蛋白C(Nuclear distribution C,NUDC)基因,構建瞭該基因的畢赤酵母錶達質粒pPICZaA-NUDC併在受體細胞Pichia pastoris GS115中穫得錶達,通過製備融閤錶達蛋白的多剋隆抗體分析其對黑色素瘤細胞活性的影響.結果錶明,剋隆的NUDC基因全長1 000bp,含有完整的編碼框,經SDS-PAGE和Western blotting分析錶明,該基因相對分子質量約為45 kD.錶達的蛋白能與兔抗NUDC抗體髮生反應,製備的NUDC蛋白抗體可抑製黑色素瘤細胞生長.
이용RT-PCR방법종소서B16흑색소류세포중극륭료전장핵천이단백C(Nuclear distribution C,NUDC)기인,구건료해기인적필적효모표체질립pPICZaA-NUDC병재수체세포Pichia pastoris GS115중획득표체,통과제비융합표체단백적다극륭항체분석기대흑색소류세포활성적영향.결과표명,극륭적NUDC기인전장1 000bp,함유완정적편마광,경SDS-PAGE화Western blotting분석표명,해기인상대분자질량약위45 kD.표체적단백능여토항NUDC항체발생반응,제비적NUDC단백항체가억제흑색소류세포생장.
