台湾海峡
檯灣海峽
태만해협
JOURNAL OF OCEANOGRAPHY IN TAIWAN STRAIT
2012年
1期
53-57
,共5页
李鹤宾%席守民%杨五彪%叶子坚
李鶴賓%席守民%楊五彪%葉子堅
리학빈%석수민%양오표%협자견
海洋生物学%锰超氧化物歧化酶%热稳定%嗜热栖热菌wl
海洋生物學%錳超氧化物歧化酶%熱穩定%嗜熱棲熱菌wl
해양생물학%맹초양화물기화매%열은정%기열서열균wl
嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)wl的超氧化物歧化酶基因在Escherichia coli BL21( DE3)中进行表达,采用Ni-NTA agarose亲和层析获得重组超氧化物歧化酶,比活力达565 U/mg.重组酶的相对分子质量为110.9 kDa,亚基相对分子质量为28.3 kDa,该酶为同聚四聚体蛋白.重组酶对氯仿-乙醇和SDS敏感,对H2O2不敏感,并且它的紫外最大吸收波长位于279 nm,判断其属于锰超氧化物歧化酶类型.1.0 mmol/dm3 Mn2+对重组酶有激活作用,同浓度的其他金属离子Mg2+、Ca2+、Ba2、Co2、Cu2+、Zn2+和Fe2+对重组酶活力都有抑制作用,其中以Co2+的作用最强,抑制了约64％的酶活性.重组酶在70℃下处理1h,保持原有活力的60％,即使在90℃下处理1h,仍保持原有活力的35％.在pH值为4.0 ～11.0的缓冲液中25℃下处理1h,保持65％以上的原始活力.由此可见,重组锰超氧化物歧化酶具有高的热稳定性和宽pH稳定性,在工业上具有巨大的应用潜力.
嗜熱棲熱菌(Thermus thermophilus)wl的超氧化物歧化酶基因在Escherichia coli BL21( DE3)中進行錶達,採用Ni-NTA agarose親和層析穫得重組超氧化物歧化酶,比活力達565 U/mg.重組酶的相對分子質量為110.9 kDa,亞基相對分子質量為28.3 kDa,該酶為同聚四聚體蛋白.重組酶對氯倣-乙醇和SDS敏感,對H2O2不敏感,併且它的紫外最大吸收波長位于279 nm,判斷其屬于錳超氧化物歧化酶類型.1.0 mmol/dm3 Mn2+對重組酶有激活作用,同濃度的其他金屬離子Mg2+、Ca2+、Ba2、Co2、Cu2+、Zn2+和Fe2+對重組酶活力都有抑製作用,其中以Co2+的作用最彊,抑製瞭約64％的酶活性.重組酶在70℃下處理1h,保持原有活力的60％,即使在90℃下處理1h,仍保持原有活力的35％.在pH值為4.0 ～11.0的緩遲液中25℃下處理1h,保持65％以上的原始活力.由此可見,重組錳超氧化物歧化酶具有高的熱穩定性和寬pH穩定性,在工業上具有巨大的應用潛力.
기열서열균(Thermus thermophilus)wl적초양화물기화매기인재Escherichia coli BL21( DE3)중진행표체,채용Ni-NTA agarose친화층석획득중조초양화물기화매,비활력체565 U/mg.중조매적상대분자질량위110.9 kDa,아기상대분자질량위28.3 kDa,해매위동취사취체단백.중조매대록방-을순화SDS민감,대H2O2불민감,병차타적자외최대흡수파장위우279 nm,판단기속우맹초양화물기화매류형.1.0 mmol/dm3 Mn2+대중조매유격활작용,동농도적기타금속리자Mg2+、Ca2+、Ba2、Co2、Cu2+、Zn2+화Fe2+대중조매활력도유억제작용,기중이Co2+적작용최강,억제료약64％적매활성.중조매재70℃하처리1h,보지원유활력적60％,즉사재90℃하처리1h,잉보지원유활력적35％.재pH치위4.0 ～11.0적완충액중25℃하처리1h,보지65％이상적원시활력.유차가견,중조맹초양화물기화매구유고적열은정성화관pH은정성,재공업상구유거대적응용잠력.
