CAJ | 학술논문

[目的]以猪源支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)百日咳杆菌黏附素(PRN)基因的原核表达产物为抗原建立检测PRN抗体的间接ELISA方法.[方法和结果]利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统对PRN基因在大肠杆菌中进行融合表达.SDS-PAGE和Western blot检测证实该基因获得高效表达,产物易于纯化且具有良好的免疫学活性.通过凝血酶酶切GST-PRN并回收,获得不含GST载体蛋白的PRN蛋白片段.以PRN蛋白片段为抗原建立检测天然PRN抗体的间接ELISA方法.该方法对猪巴氏杆菌病等7种常见细菌性疾病阳性血清的检测结果均为阴性,其敏感性比乳胶凝集试验提高4～128倍,能检测到人工感染14 d后的仔猪血清抗体IgG,对临床送检的1,229份猪血清的检测阳性率为32.7%.ELISA方法对阳性猪场的监测结果预示了保育期仔猪的合群导致猪群大量感染支气管败血波氏杆菌.[结论]该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于猪群PRN抗体水平监测和猪波氏菌病流行病学调查.
[목적]이저원지기관패혈파씨간균(Bordetella bronchiseptica,Bb)백일해간균점부소(PRN)기인적원핵표체산물위항원건립검측PRN항체적간접ELISA방법.[방법화결과]이용곡광감태-S-전이매(GST)표체계통대PRN기인재대장간균중진행융합표체.SDS-PAGE화Western blot검측증실해기인획득고효표체,산물역우순화차구유량호적면역학활성.통과응혈매매절GST-PRN병회수,획득불함GST재체단백적PRN단백편단.이PRN단백편단위항원건립검측천연PRN항체적간접ELISA방법.해방법대저파씨간균병등7충상견세균성질병양성혈청적검측결과균위음성,기민감성비유효응집시험제고4～128배,능검측도인공감염14 d후적자저혈청항체IgG,대림상송검적1,229빈저혈청적검측양성솔위32.7%.ELISA방법대양성저장적감측결과예시료보육기자저적합군도치저군대량감염지기관패혈파씨간균.[결론]해방법구유특이성강、민감성고、중복성호적특점,가용우저군PRN항체수평감측화저파씨균병류행병학조사.