中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2010年
3期
252-256
,共5页
郝军%郑书深%赵建德%刘青娟%赵松%刘淑霞%刘巍%段惠军
郝軍%鄭書深%趙建德%劉青娟%趙鬆%劉淑霞%劉巍%段惠軍
학군%정서심%조건덕%류청연%조송%류숙하%류외%단혜군
固醇调节元件结合蛋白-1%人肾小管上皮细胞%脂滴形成%质粒转染
固醇調節元件結閤蛋白-1%人腎小管上皮細胞%脂滴形成%質粒轉染
고순조절원건결합단백-1%인신소관상피세포%지적형성%질립전염
目的 SREBP-1重组质粒转染人肾小管上皮细胞(HKC)检测SREBP-1基因表达和细胞内脂滴的关系.方法 体外培养人肾小管上皮细胞并随机分为空白对照组、pcDNA3.1空质粒对照组和pcDNA3.1-SC1重组质粒转染组,采用阳离子脂质体法将SREBP-1特异性质粒pcDNA3.1-SC1及pcDNA3.1空质粒转染到细胞内并培养48小时,半定量RT-PCR和Western blot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴.结果 pcDNA3.1-SC1重组质粒转染的细胞内SREBP-1 mRNA表达呈现明显升高,扩增条带积分光密度值分别是空白对照组和阴性对照组的6.158倍和4.194倍,SREBP-1蛋白也出现明显上调,条带积分光密度值为3.092±0.254.空白对照组和pcDNA3.1阴性对照组细胞内均未见有红染脂滴颗粒,而pcDNA3.1-SC1重组质粒转染组中出现了清晰的红染颗粒.结论 SREBP-1表达可增加人肾小管上皮细胞脂肪合成证实HKC细胞中SREBP-1表达和脂滴形成之间存在有直接关系.
目的 SREBP-1重組質粒轉染人腎小管上皮細胞(HKC)檢測SREBP-1基因錶達和細胞內脂滴的關繫.方法 體外培養人腎小管上皮細胞併隨機分為空白對照組、pcDNA3.1空質粒對照組和pcDNA3.1-SC1重組質粒轉染組,採用暘離子脂質體法將SREBP-1特異性質粒pcDNA3.1-SC1及pcDNA3.1空質粒轉染到細胞內併培養48小時,半定量RT-PCR和Western blot分析目標基因錶達豐度的變化,併採用油紅O染色檢測細胞內脂滴.結果 pcDNA3.1-SC1重組質粒轉染的細胞內SREBP-1 mRNA錶達呈現明顯升高,擴增條帶積分光密度值分彆是空白對照組和陰性對照組的6.158倍和4.194倍,SREBP-1蛋白也齣現明顯上調,條帶積分光密度值為3.092±0.254.空白對照組和pcDNA3.1陰性對照組細胞內均未見有紅染脂滴顆粒,而pcDNA3.1-SC1重組質粒轉染組中齣現瞭清晰的紅染顆粒.結論 SREBP-1錶達可增加人腎小管上皮細胞脂肪閤成證實HKC細胞中SREBP-1錶達和脂滴形成之間存在有直接關繫.
목적 SREBP-1중조질립전염인신소관상피세포(HKC)검측SREBP-1기인표체화세포내지적적관계.방법 체외배양인신소관상피세포병수궤분위공백대조조、pcDNA3.1공질립대조조화pcDNA3.1-SC1중조질립전염조,채용양리자지질체법장SREBP-1특이성질립pcDNA3.1-SC1급pcDNA3.1공질립전염도세포내병배양48소시,반정량RT-PCR화Western blot분석목표기인표체봉도적변화,병채용유홍O염색검측세포내지적.결과 pcDNA3.1-SC1중조질립전염적세포내SREBP-1 mRNA표체정현명현승고,확증조대적분광밀도치분별시공백대조조화음성대조조적6.158배화4.194배,SREBP-1단백야출현명현상조,조대적분광밀도치위3.092±0.254.공백대조조화pcDNA3.1음성대조조세포내균미견유홍염지적과립,이pcDNA3.1-SC1중조질립전염조중출현료청석적홍염과립.결론 SREBP-1표체가증가인신소관상피세포지방합성증실HKC세포중SREBP-1표체화지적형성지간존재유직접관계.
