南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
8期
1793-1796
,共4页
IFN-γ基因%乙型肝炎病毒%表达载体%基因转染
IFN-γ基因%乙型肝炎病毒%錶達載體%基因轉染
IFN-γ기인%을형간염병독%표체재체%기인전염
目的 观察携带人γ干扰素(IFN-γ)基因的真核表达载体(pcDNA3.1-IFN-γ)体外转染hepG2.2.15细胞后抑制乙型肝炎病毒(HBV)的作用.方法 利用PCR技术和基因重组方法构建表达人IFN-γ的真核表达载体,体外转染hepG2.2.15细胞后收集细胞培养上清液,用ELISA法检测人IFN-γ蛋白的分泌量.并分别用荧光定量PCR和ELISA试剂盒检测细胞培养上清中病毒释放的HBV-DNA和HBeAg、HBsAg抗原含量.结果 转染pcDNA3.1-IFN-γ组细胞HBeAg含量比空载体阴性对照组和空白2.2.15细胞对照组下降了49%,而两个对照组间HBeAg含鼍无显著差异;HBsAg含量比宅载体阴性对照组下降了35%、比空白2.2.15细胞对照组下降了33%,两个对照组问HBsAg含量无显著差异.同时,转染pcDNA3.1-IFN-γ组细胞上清中HBVDNA含量比两个对照组均显著降低,而对照组间HBVDNA含量无显著差异.结论 成功构建了人IFN-γ真核表达载体并可以在体外有效抑制HBV复制,为将人IFN-γ应用于抗HBV的基因治疗奠定基础.
目的 觀察攜帶人γ榦擾素(IFN-γ)基因的真覈錶達載體(pcDNA3.1-IFN-γ)體外轉染hepG2.2.15細胞後抑製乙型肝炎病毒(HBV)的作用.方法 利用PCR技術和基因重組方法構建錶達人IFN-γ的真覈錶達載體,體外轉染hepG2.2.15細胞後收集細胞培養上清液,用ELISA法檢測人IFN-γ蛋白的分泌量.併分彆用熒光定量PCR和ELISA試劑盒檢測細胞培養上清中病毒釋放的HBV-DNA和HBeAg、HBsAg抗原含量.結果 轉染pcDNA3.1-IFN-γ組細胞HBeAg含量比空載體陰性對照組和空白2.2.15細胞對照組下降瞭49%,而兩箇對照組間HBeAg含鼉無顯著差異;HBsAg含量比宅載體陰性對照組下降瞭35%、比空白2.2.15細胞對照組下降瞭33%,兩箇對照組問HBsAg含量無顯著差異.同時,轉染pcDNA3.1-IFN-γ組細胞上清中HBVDNA含量比兩箇對照組均顯著降低,而對照組間HBVDNA含量無顯著差異.結論 成功構建瞭人IFN-γ真覈錶達載體併可以在體外有效抑製HBV複製,為將人IFN-γ應用于抗HBV的基因治療奠定基礎.
목적 관찰휴대인γ간우소(IFN-γ)기인적진핵표체재체(pcDNA3.1-IFN-γ)체외전염hepG2.2.15세포후억제을형간염병독(HBV)적작용.방법 이용PCR기술화기인중조방법구건표체인IFN-γ적진핵표체재체,체외전염hepG2.2.15세포후수집세포배양상청액,용ELISA법검측인IFN-γ단백적분비량.병분별용형광정량PCR화ELISA시제합검측세포배양상청중병독석방적HBV-DNA화HBeAg、HBsAg항원함량.결과 전염pcDNA3.1-IFN-γ조세포HBeAg함량비공재체음성대조조화공백2.2.15세포대조조하강료49%,이량개대조조간HBeAg함타무현저차이;HBsAg함량비택재체음성대조조하강료35%、비공백2.2.15세포대조조하강료33%,량개대조조문HBsAg함량무현저차이.동시,전염pcDNA3.1-IFN-γ조세포상청중HBVDNA함량비량개대조조균현저강저,이대조조간HBVDNA함량무현저차이.결론 성공구건료인IFN-γ진핵표체재체병가이재체외유효억제HBV복제,위장인IFN-γ응용우항HBV적기인치료전정기출.
