北京大学学报(医学版)
北京大學學報(醫學版)
북경대학학보(의학판)
JOURNAL OF PEAKING UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2002年
6期
684-687
,共4页
曾令娥%黄晶%白惠卿%范慧%黄大无%王露
曾令娥%黃晶%白惠卿%範慧%黃大無%王露
증령아%황정%백혜경%범혜%황대무%왕로
DNA聚合酶 Ⅰ/生物合成%人血清白蛋白%重组融合蛋白质类/生物合成%DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段
DNA聚閤酶 Ⅰ/生物閤成%人血清白蛋白%重組融閤蛋白質類/生物閤成%DNA聚閤酶Ⅰ Klenow片段
DNA취합매 Ⅰ/생물합성%인혈청백단백%중조융합단백질류/생물합성%DNA취합매Ⅰ Klenow편단
目的:提高Klenow酶的热稳定性和储藏稳定性.方法:利用PCR的方法扩增DH5α染色体DNA,构建编码Klenow和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中获得高效表达.分别对Klenow酶和Klenow-HSA融合蛋白进行纯化,并进行活性及稳定性的研究.结果:发现Klenow-HSA融合蛋白在大肠杆菌中呈可溶性表达.体外实验证实这种融合蛋白具有与Klenow聚合酶相同的活性,其稳定性明显提高.结论:融合蛋白确实能增加Klenow酶的热稳定性和储存稳定性,为研制新一代高稳定性Klenow酶提供了基础.
目的:提高Klenow酶的熱穩定性和儲藏穩定性.方法:利用PCR的方法擴增DH5α染色體DNA,構建編碼Klenow和人血清白蛋白第三功能區(HSA-D3)的融閤蛋白錶達質粒,併在大腸桿菌中穫得高效錶達.分彆對Klenow酶和Klenow-HSA融閤蛋白進行純化,併進行活性及穩定性的研究.結果:髮現Klenow-HSA融閤蛋白在大腸桿菌中呈可溶性錶達.體外實驗證實這種融閤蛋白具有與Klenow聚閤酶相同的活性,其穩定性明顯提高.結論:融閤蛋白確實能增加Klenow酶的熱穩定性和儲存穩定性,為研製新一代高穩定性Klenow酶提供瞭基礎.
목적:제고Klenow매적열은정성화저장은정성.방법:이용PCR적방법확증DH5α염색체DNA,구건편마Klenow화인혈청백단백제삼공능구(HSA-D3)적융합단백표체질립,병재대장간균중획득고효표체.분별대Klenow매화Klenow-HSA융합단백진행순화,병진행활성급은정성적연구.결과:발현Klenow-HSA융합단백재대장간균중정가용성표체.체외실험증실저충융합단백구유여Klenow취합매상동적활성,기은정성명현제고.결론:융합단백학실능증가Klenow매적열은정성화저존은정성,위연제신일대고은정성Klenow매제공료기출.
