重庆师范大学学报(自然科学版)
重慶師範大學學報(自然科學版)
중경사범대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF CHONGQING NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
1期
14-19
,共6页
草鱼%胰蛋白酶%亲和层析%性质研究
草魚%胰蛋白酶%親和層析%性質研究
초어%이단백매%친화층석%성질연구
本试验采用硫酸铵分级沉淀和鸡卵类粘蛋白偶联的琼脂糖凝胶亲和层析的方法,从草鱼(Ctenopharyngodon Idellus)肝胰脏中提取胰蛋白酶进行纯化,得到两种酶,即胰蛋白酶A(GTA)和胰蛋白酶B(GTB),并对其性质进行了分析.结果表明,两种酶的SDS-PAGE电泳均呈现出单一条带,表明已得到高度纯化,两种酶分子量约为27 Kda.以BANPA为底物,测得草鱼胰蛋白酶A(GTA)的动力学常数(Km)为0.37 mM.以TAME为底物测得两种胰蛋白酶最适反应温度为60℃,最适反应pH值为8.0,当温度超过60℃,它们不稳定,这两种胰蛋白酶在pH值9.0~11.0时较稳定.
本試驗採用硫痠銨分級沉澱和鷄卵類粘蛋白偶聯的瓊脂糖凝膠親和層析的方法,從草魚(Ctenopharyngodon Idellus)肝胰髒中提取胰蛋白酶進行純化,得到兩種酶,即胰蛋白酶A(GTA)和胰蛋白酶B(GTB),併對其性質進行瞭分析.結果錶明,兩種酶的SDS-PAGE電泳均呈現齣單一條帶,錶明已得到高度純化,兩種酶分子量約為27 Kda.以BANPA為底物,測得草魚胰蛋白酶A(GTA)的動力學常數(Km)為0.37 mM.以TAME為底物測得兩種胰蛋白酶最適反應溫度為60℃,最適反應pH值為8.0,噹溫度超過60℃,它們不穩定,這兩種胰蛋白酶在pH值9.0~11.0時較穩定.
본시험채용류산안분급침정화계란류점단백우련적경지당응효친화층석적방법,종초어(Ctenopharyngodon Idellus)간이장중제취이단백매진행순화,득도량충매,즉이단백매A(GTA)화이단백매B(GTB),병대기성질진행료분석.결과표명,량충매적SDS-PAGE전영균정현출단일조대,표명이득도고도순화,량충매분자량약위27 Kda.이BANPA위저물,측득초어이단백매A(GTA)적동역학상수(Km)위0.37 mM.이TAME위저물측득량충이단백매최괄반응온도위60℃,최괄반응pH치위8.0,당온도초과60℃,타문불은정,저량충이단백매재pH치9.0~11.0시교은정.