CAJ | 학술논문

目的:为满足基因治疗的需要构建人白细胞介素12(hIL-12)双亚基共表达质粒.方法:先从人胚肾组织的逆转录产物中用PCR方法扩增出它的两个亚基P40和P35的cDNA全长,分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+/-)中构建单亚基质粒--P(+)/P40和P(-)/P35,然后再将二者串联克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中得到P(+)/IL-12质粒.脂质体转染HepG2后24,48 h ELISA检测细胞培养上清内hIL-12蛋白质表达.结果:P(+)/IL-12质粒经酶切和测序证明两亚基连接方向正确,序列无突变;ELISA检测细胞上清结果证实可表达hIL-12蛋白质.结论:成功构建P40和P35双亚基真核共表达质粒--P(+)/IL-12,为模拟hIL-12生理表达方式,简化hIL-12基因治疗操作奠定了基础.
목적:위만족기인치료적수요구건인백세포개소12(hIL-12)쌍아기공표체질립.방법:선종인배신조직적역전록산물중용PCR방법확증출타적량개아기P40화P35적cDNA전장,분별극륭입진핵표체재체pcDNA3.1(+/-)중구건단아기질립--P(+)/P40화P(-)/P35,연후재장이자천련극륭입진핵표체재체pcDNA3.1(+)중득도P(+)/IL-12질립.지질체전염HepG2후24,48 h ELISA검측세포배양상청내hIL-12단백질표체.결과:P(+)/IL-12질립경매절화측서증명량아기련접방향정학,서렬무돌변;ELISA검측세포상청결과증실가표체hIL-12단백질.결론:성공구건P40화P35쌍아기진핵공표체질립--P(+)/IL-12,위모의hIL-12생리표체방식,간화hIL-12기인치료조작전정료기출.